414 Leopold Auerbach, 



dünnte wässerige Methylgrünlösung für einige Zeit, je nach der Kon- 

 zentration derselben für eine halbe bis zu mehreren Stunden ein- 

 gestellt und dann zur Beseitigung der Überfärbung für 5 — 15 Minuten 

 in absoluten Alkohol gebracht. — Diese Methode liefert im allgemeinen 

 sehr schöne Präparate und ganz dieselben Ergebnisse wie die anderen. 

 Ich habe sie indessen nur selten angewandt und kann deshalb auch 

 nicht sagen, ob sie alle die vielen Einzelheiten, auf die es ankommt, 

 ebenso deutlich zeigt wie die jetzt folgenden. 



B) Säurefüchsin und Methylgrün. 



Ba) Simultan, 



Während es für diese Art der Doppelfärbung bei den ausgebildeten 

 Samen dementen und so manchen anderen Zellen auf ein sehr genaues 

 Mischungsverhältnis der beiden Farbstoffe nicht ankommt und die be- 

 zügliche, früher (1 d) von mir angegebene Verfahrungsweise, obwohl 

 sie nicht gerade exakt ist, sich dennoch als ganz ausreichend er- 

 wiesen hat, so ist es hingegen nicht ganz ebenso bei spermatogene- 

 tischen Untersuchungen. Ich bin aber jetzt in der Lage, eine ge- 

 nauere, auch für diesen Zweck sich bewährende Vorschrift zu geben. 

 Man bereite sich zwei einfache Lösungen, indem man einen Teil 

 Methylgrün und ebenso einen Teil Säurefuchsin in je 1000 Teilen 

 Wasser löst. Der letzteren, nämlich der roten Lösung, füge man 

 ein klein wenig Essigsäure hinzu und zwar auf je 50 g einen 

 Tropfen einer 10 - proz. wässerigen Eisessiglösung. Dann mische 

 man 2 Teile der roten mit 3 Teilen der blaugrünen Flüssigkeit. 

 Filtrieren des Gemisches ist kaum nötig; will man es aber thun, so 

 benutze man ein vorher mit Methylgrün gefärbtes Filter, weil das 

 Papier von diesem Farbstoff viel mehr absorbiert als vom Säure- 

 fuchsin und dadurch, namentlich bei kleiner Quantität der zu filtrieren- 

 den Flüssigkeit , das Mischungsverhältnis derselben nicht ganz un- 

 wesentlich ändert. In die kombinierte Lösung wird nun die das Prä- 

 parat tragende Glasplatte für 5 — 15 Minuten eingestellt, nachdem von 

 letzterer der Alkohol möglichst beseitigt und nur das Präparat selbst 

 noch etwas feucht gelassen worden ist. Es darf übrigens auch länger, 

 als angegeben, in der tingierenden Flüssigkeit verweilen, was jedoch 

 meistens nicht nötig ist und die folgende Operation umständlicher 

 macht. Das notwendige Minimum der Tinktionsdauer wächst natür- 

 lich mit der Dicke der zu färbenden Schicht, bei einem Schnitte aber 

 auch mit der Flächenausdehnung desselben, indem, wie aufmerksame 

 Beobachtung ergiebt, die Aufnahme der Farbstoffe immer viel stärker 

 als von der freien Fläche vom freien Rande des Schnittes her erfolgt, 

 an diesem schnell sich steigert und von hier aus langsam nach der 

 Mitte hin fortschreitet, so daß eine Zeit lang ein mittleres, nur sehr 

 schwach gefärbtes Feld vorhanden ist, während eine Randzone schon 

 intensiv tingiert ist. Aber auch die Temperatur hat einen sehr merk- 

 lichen Einfluß und zwar derart, daß höhere Temperatur vorzugsweise 

 die Absorption des Methylgrün beschleunigt, niedere die letztere 



