( 127 ) 



lipase afgescheiden, zoodat de kultuurvloeistof in een bij 30° geplaatst 

 vetbuisje reeds na 1 uur de lipasereaetie geeft. 



De volgende onderzoekingen zijn verricht met kuituren welke 

 6 — 10 dagen oud waren. 



Bij proeven over de ontleding der microbenlipase door tempera- 

 tuursin vloeden bleek het vetsplitsend enzym van de groep der smel- 

 tende fluorescenten tegen zeer hooge temperaturen bestand. 



De hoeveelheid lipase, welke na eene verhitting bij een bepaalde 

 temperatuur en gedurende zekeren tijd nog actief is, kan kwantita- 

 tief worden bepaald door middel van titratie der door deze lipase 

 uit vet afgesplitste hoeveelheid vetzuren. 



Met behulp van de vetbuisjes-methode kunnen we de hoeveelheid 

 nog actieve lipase in de kuituur schatten door vergelijking, met meer 

 of minder verwarmde preparaten, aangezien de graad van verkleu- 

 ring van het vet in de buisjes overeenkomt met de sterkte der 

 gebezigde lipasepreparaten, mits de alkaliteit daarvan dezelfde is. 



De eerste proeven over de ontleding der lipase door den invloed 

 van hooge temperaturen geschiedden bij 75° C. en werden op de 

 volgende wijze uitgevoerd. 



In een waterbad van 75° werden steriele reageerbuisjes gebracht 

 met JO cM' eener lipase bevattende kuituur. Het niveau in de 

 buisjes was ongeveer 3 cM. beneden het niveau van het waterbad. 



De vloeistof in de buisjes heeft na twee minuten de temperatuur 

 van het waterbad aangenomen, zoodat de aanvang der verhitting 

 van dat oogenblik af gerekend wordt. De verhitting der kultuur- 

 vloeistof in de reeks buizen duurde resp. 10, 20, 30, 40, 50 en 60 

 minuten, daarna werd de inhoud, na snelle afkoeling, overgeschonken 

 in een vetbuisje, dat vervolgens '24 uur bij 30° geplaatst bleef. 



Bij de vergelijking van de intensiteit der verkleuring van het vet 

 in de buizen kon worden vastgesteld, dat de lipase door de ver- 

 hitting slechts in geringe mate was ontleed. Zelfs een uur verhitten 

 op 75° C. veroorzaakt geringe afname in de activiteit der lipase. 

 Analoge proeven bij 84°— 85° toonden aan dat na één uur ver- 

 hitting nog een belangrijk de3l der lipase werkzaam was gebleven, 

 echter kon na 40 minuten verwarming duidelijke vermindering der 

 enzym werking worden vastgesteld. 



Deze feiten toonen reeds aan dat de lipase van de groep der 

 B. fluorescens liquefaciëns bestendiger is tegen hooge temperaturen 

 dan andere enzymen als diastase, katalase, urease, trypsine enz., 

 welke alle ontleed zijn na eene verhitting gedurende 30 minuten 

 op 75°. 



Uit de volgende proeven zal echter blijken, dat het vetsplitsend 



