CYT0L0GIQUES SUE LES BACTÉRIES FIXATRICES D AZOTE. 39 



car elles peuvent, à l'étude systématique du problème, jetter une lumière 

 sur L'essence des processus formatifs dans la cellule. En ce qui concerne 

 notre expérience, nous voulons encore signaler que l'addition graduelle 

 du phosphate au milieu provoque non seulement l'augmentation du 

 nombre de corpuscules métachromatiques dans la cellule, mais encore 

 une série d'autres changements: les cellules de YAzotobacter deviennent 

 plus petites, sont entourée de capsules plus petites et, à des concentrations 

 considérables du sel, la culture cesse de produire du pigment. 



Des réactions caractéristiques de la volutine il faut signaler la déco- 

 loration par une, solution de carbonate de sodium à 5% '^ (!K corpuscules 

 colorés avec le bleu de méthylène et l'absence de décoloration après le 

 traitement de la préparation par l'acide sulfurique à 1%. Si l'on traite 

 par la solution de Lugol (solution d'iode en iodure de potassium) une 

 préparation colorée avec du bleu de méthylène, le protoplasma se colore 

 en jaune-brun, et les corpuscules métachromatiques prennent une colora- 

 tion presque noire. Si l'on traite ensuite la préparation par une solution 

 de carbonate de sodium à 5%, la coloration bleu primitive du protoplasma 

 se rétablit, tandis que les corpuscules métachromatiques deviennent 

 incolores. Si l'on fait bouillir la préparation pendant 5 minutes dans de 

 l'eau, les corpuscules métachromatiques se dissolvent. A la coloration 

 d'après Neisser, les grains prennent une coloration superbe de violet 

 foncé et le protoplasma de jaune brun. La coloration avec l'hématoxyline 

 do \) e I a f i e 1 d et II a n s e n ne présente pas d'avantages par rapport au 

 bleu de méthylène. Par la coloration vitale d'après Nakanischi, on 

 atteint une coloration graduelle de la cellule de VAzotobacter à partir de 

 la capsule. Durant les premières trente minutes, on ne voit pas de granu- 

 lations, mais quelques heures plus tard, elles se révèlent d'une manière 

 bien prononcée. La préparation colorée avec le bleu de méthylène se 

 décolore peu à peu par la rongalite (Rongalitweiss de Grubler), d'abord 

 se décolore le protoplasma,, ensuite les grains métachromatiques. 



Л la coloration avec la solution de Giemsa, la capsule de YAzoto- 

 bmter se colore en violet-rougeâtre, le protoplasma en bleu et les grains 

 métachromatiques en rouge (particulièrement bien sur les préparations 

 des cultures sur gélose dextrinée). 



J'ai obtenu une excellente coloration double pour différencier les 

 grains métachromatiques par une des méthodes suivantes: 



L lbre méthode a été déjà décrite plus haut (p. 31). 



A cette coloration, les grains se colorent en rouge et le protoplasma en 

 bleu. Л cette méthode on peut se servir de n'importe quelle combinaison de 

 deux couleurs présentant un contraste en ce qui concerne leur effet colorant. 



2ième щ é t h о d e. a) Coloration pendant 3 à 5 minutes avec une 

 solution de bleu de méthylène (1 : 40). 



