ET LA BrÔLOGIE DES- BACTÉRIES FIXANT l'aZOTE. j 67 



Si l'on en fait une préparation, on constate habituellement, à coté de 

 grandes cellules typiques de Y Azotohacter , une certaine quantité d'autres 

 espèces. Le plus souvent, ce sont des petites bactéries ne formant pas 

 de spores, mais il y a aussi des infusoires et des amibes. Celles-ci qui 

 se nourrissent, entre autres, de cellules de Y Azotohacter se développent 

 parfois en grande quantité: Tout ce monde vivant se contente de traces 

 des matières azotées, contenues dans le milieu, et appartient, selon la 

 terminologie de Beijerinck, à la catégorie d'organismes microaérophiles. 

 Les espèces étrangères, ainsi que l'a constaté encore Beijerinck (l), 

 favorisent le développement du voile; sans elles le voile n'atteint jamais un 

 tel développement abondant. L'analyse biologique de ce mélange pré- 

 sente un grand intérêt par les nombreux problèmes qu'elle soulève et qui 

 qui sont encore à résoudre. En se développant, le voile commence à se 

 rider et s'élève légèrement aux parois de la fiole. Une semaine ou dix 

 jours après l'ensemencement, le voile qui était d'abord blanc ou grisâtre 

 commence peu à peu à devenir foncé et prend parfois une couleur presque 

 noir. Ce caractère n'est pas pourtant constant : il y a des races de Y Azoto- 

 hacter qui ne deviennent pas foncées. 



Après plusieurs passages dans les mêmes conditions, lorsqu'on a 

 établi que la composition du mélange bsctérial est plus ou moins con- 

 stant, on se met à l'isolement de Y Azotohacter en culture pure. En ce qui 

 concerne la question de l'âge des cultures qui doivent servir de point de 

 départ pour les cultures pures, les opinions des différents auteurs sont dif- 

 férents. Certains auteurs donnent la préférence aux cultures fraîches où 

 des zooglaées ne se sont pas encore formées, tandis que les autres, au 

 contraire, affirment que des vieilles cultures conviennent mieux à ce but 

 [Krze mie nie w ski (1)]. Il est mieux, sans se tenir à une règle géné- 

 rale, de soumettre chaque fois la culture avant l'isolement de Y Azotohacter, 

 à une analyse microscopique et de ne faire d'ensemencement en milieux 

 solides qu'au cas, où la culture contient une quantité suffisante de cel- 

 lules isolées qui ne sont pas réunies dans des zooglaées. 



Pour préparer des milieux solides, on se sert de mêmes solutions 

 que pour l'accumulation de Y Azotohacter, en ajoutant 1 à 2% de gélose. 

 Certains auteurs [Lipman (1)] ajoutent au milieu encore 0,0005 p. 100 

 de nitrate de potassium. Beijerinck (l), au contraire, évite l'addition 

 des sels et recommande de préparer le milieu avec de l'eau distillée, la gé- 

 lose elle-même contenant une quantité suffisante de sels. Suivant В eij e- 

 rinck (8), le milieu qui convient le mieux est une gélose qui est préparée 

 d'une manière spéciale avec du malate de calcium. Tandis que sur la 

 gélose mannitée ce ne sont au plus que 2% de cellules qui se déve- 

 loppent en colonies, sur la gélose avec du malate de calcium il y en a 

 65 % et plus. Les colonies ont sur ce milieu un aspect caractéristique ; 



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