SUR LA DISTRIBUTION DES BACTÉRIES AZOTO -FIXATRICES ETC. 465 



leurs propriétés électives. Les tentatives d'accumuler et d'isoler YAzoto- 

 bacter n'ont eu de résultat négatif que dans de rares occasions. Ainsi, nous 

 avons manqué de l'obtenir du sable des steppes Kirghises, gouv. d'Astrakhan, 

 quoique nons ayons réussi à en isoler la culture du fixateur d'azote sporogène 

 anaérobie — Olostridium Pasteurianum (v. ci-dessous). La présence de VAzo- 

 tobacter n'a été non plus constatée dans les terrains tourbeux de la toundra 

 de Bolchezemelsk (expériences de S. B. Kerzelli). 



L'enduit formé à la surface du liquide a été soumis à l'examen micro- 

 scopique. Nous étant assurés de la présence de Y Azotobacter, nous avons 

 fait un prélèvement et en réensemencé le milieu de la même composition. 

 La pousse était considérablement facilitée, si avant de stériliser le milieu on 

 y ajoutait une poignée de terre. Lorsque se formait l'enduit on y faisait un 

 nouveau prélèvement et ainsi de suite. Pour isoler Y Azotobacter on se servait 

 généralement de la 3 — 4-me génération ou même d'une génération plus 

 ultérieure. Le prélèvement pour ensemencer un milieu dense doit être fait 

 de préférence avant que les cellules de Y Azotobacter aient formé des zooglées. 

 Avant de procéder à l'ensemencement on doit diluer soigneusement le ma- 

 tériel dans une petite quantité d'eau stérilisée ou de solution physiologique 

 de chlorure de sodium (0,85°/ ). 



Pour isoler la bactérie on employait les milieux sus-indiqués en y 

 ajoutant 1,5 — 2°/ de gélose. On choisissiat également celui des milieux 

 qui favorisât particulièrement la pousse de la race de Y Azotobacter qu'on 

 allait isoler. On étendait la semence à la surface du milieu coagulé à l'aide 

 d'un bâton de verre courbé sous angle. On employait au moins 5 capsules de 

 Pétri pour assurer la dilution suffisante' de la semence. 



D'épaisses et muqueuses colonies (Y 'Azotobacter apparues au bout de 

 quelques jours à la surface du milieu rappelaient par leur aspect les gouttes 

 de colle de farine. Elles étaient particulièrement caractéristiques sur gélose 

 de dextrine avec de la craie: les colonies à' Azotobacter chroococcum sur ce 

 milieu commençaient rapidement à devenir noires l ) en différant nettement de 

 celles des espèces qui les accompagnaient 2 ). Dans certaines colonies, pré- 

 alablement soumises à l'examen microscopique, on faisait des prélèvements 

 qu'on coulait dans des tubes à essai contenant le milieu de la même composi- 

 tion, coagulé obliquement. 



Pour contrôler la pureté des cultures isolées, à part l'examen micro- 

 scopique, on faisait des observations sur le caractère de leur pousse sur 



1) Omeliansky u. Ssewerowa, Gentralbhf. Bact., 2 part., v. 29, p. 643, 1911. 



2) Certaines espèces de V Azotobacter donnent sur le milieu en question un enduit incolore 

 ce qui facilite considérablement la différenciation des espèces et races de Y Azotobacter. 



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