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SUR LA DISTRIBUTION DES BACTÉRIES AZOTO-EIXATRICES ETC. 47l : 



de la culture était ordinairement si riche en microbe spécifique qu'on pouvait 

 procéder à son isolation sur milieu dense avec succès probable. En même 

 temps les cultures enrichies nous servaient à déterminer le degré de la fixation 

 de l'azote libre de l'atmosphère. 



Pour isoler les cultures pures de Glostridiwn Pasteurianum nous avons 

 employé comme milieu dense les tranches de pomme de terre enduites à la 

 surface avec de la craie pour neutraliser l'acide butyrique. On mettait les 

 tranches rondes de pomme de terre dans les capsules de Pétri (6 cm. de 

 diamètre), sur quelques ronds de papier à filtrer, et on les stérilisait durant 

 une demi-heure à 120°. On ensemençait avec les spores prélevées au fond 

 du ballon. Nous pasteurisions le matériel prélevé pendant 15 minutes et 

 nous l'introduisions ensuite à l'aide d'une aiguille-spatule dans la superficie 

 enduite de craie d'une tranche de pomme de terre, en le diluant 5 fois au 

 moins. On transportait les capsules dans un exsiccateur, d'où on pompait 

 l'air. On plaçait l'exsiccateur dans un thermostat à 35°. Au bout de quel- 

 ques jours apparaissaient à la surface de la pomme de terre des colonies 

 gonflées, d'un blanc jaunâtre, dégageant le gaz. Ayant ouvert l'exsiccateur 

 et nous étant assurés que les colonies appartenaient à une espèce voisine à 

 Cïostridium Pasteurianum, nous y faisions des prélèvements sur tranches de 

 pomme de terre enduites de craie, dans des éprouvettes de Roux, dont ou 

 pompait l'air et que l'on soudait ensuite. Dans cet état le matériel pouvait 

 se conserver longtemps et servir aux expériences. 



Lorsque l'isolation avec le procédé sus-indiqué ne réussissait pas, nous 

 le changions de la façon suivante. On faisait un prélèvement dans le sédiment 

 de craie au fond des ballons qu'on mettait dans un tube à essai avec une 

 haute colonne de liquide contenant 1% de dextrose et 0,05 de phosphate 

 d'ammonium. Lorsque commençait la fermentation on sortait le matériel 

 pour en ensemencer la pomme de terre. Dans certains cas nous n'avons pu 

 obtenir des cultures pures qu'en procédant de cette manière. 



La détermination des espèces de Cïostridium Pasteurianum présente 

 encore plus de difficultés que chez VAzotobacter, vu l'existence d'une grande 

 quantité de formes transitoires et la variété des caractères chez les individus. 

 En général, la classification des bactéries d'acide oléique est si peu élaborée 

 qu'il est difficile de se baser sur elle en délimitant les espèces. Bredemann 1 ) 

 qui poursuivait le but de faire l'étude comparée des diverses races de JBact. 

 amylobacter (synonyme de Cïostridium Pastewrianum) les cultivait préalable- • 

 ment pendant quelques semaines dans des conditions identiques pour aplanir 



1) Bredemann, Centralblf. Bakt, 2 part, v., 22, p. 41, 190S. 



