31 



Reaktion mit Indigo ein anderes Bedenken entgegen, welches den Wert der- 

 selben sebr fraglicli macht: Das Indigoweiß ist nämlich dem molekularen 

 Luftsauerstoff gegenüber sehr empfindlich, es oxydiert sich momentan bei der 

 Berührung mit Luft, entspricht also nicht der ersten der im allgemeinen Teil 

 aufgestellten Forderungen. Bringt man z. B. einen Gewebsschnitt in eine 

 Lösung von Indigoweiß und nachher zum Zwecke der Auswaschung und Oxy- 

 dation in Wasser, so bedeckt sich der Schnitt schon während des kurzen Über- 

 tragens durch Luft derartig mit Niederschlägen, daß eine Verwertung zur 

 mikroskopischen Untersuchung ausgeschlossen ist. Ich suchte nun diese Schwierig- 

 keit dadurch zu umgehen, daß ich einerseits eine vorzeitige Oxydation zunächst 

 durch Fernhalten von Sauerstoff hintanhielt, andererseits eine wertvolle Eigen- 

 schaft des Indigo ausnützte, daß er nämlich keine chemischen Affinitäten zum 

 Gewebe besitzt. Wenn man z. B. einen mit Indigoweiß durchtränkten Schnitt 

 unter strengem Ausschluß von Sauerstoff nachträglich auswäscht, so zeigt sich, 

 daß das Indigoweiß tatsächlich nicht vom Gewebe zurückgehalten wird, mit 

 Ausnahme von gewissen Granulis, welche mir mit den Indophenol-Osydase- 

 Granulis identisch zu sein scheinen. 



Es soll zunächst nun die Technik der Ausführung genau beschrieben 

 werden, da sie mit mancherlei Schwierigkeiten zu kämpfen hat. 



Die hierzu nötige Indigoküpe bereitete ich nach einer von den Höchster 

 Farbwerken in liebenswürdiger Weise zur Verfügung gestellten Vorschrift : 

 50 g Indigo M. L. B. Teig (20 prozentig) werden mit ca. 500 ccra heißem 

 Wasser (50 — 60 Grad) angeteigt, 15 ccm Natronlauge von 40 Grad Be. zu- 

 gegeben und dann langsam 13 — 15 g Hydrosulfit konzentriert unter Rühren 

 eingestreut; in 15 Minuten ist die Verküpung beendet. Es erwies sich als 

 vorteilhaft, die zienilich konzentrierte Küpe mit etwa 5 Teilen Wasser, dem 

 eine Spur Hydrosulfit zugesetzt war, zu verdünnen. 



Da sich auf der Lösung sofort der bekannte „Spiegel" von oxydiertem 

 Indigo bildet, so ist es, wenn man Niederschläge vermeiden will, nicht an- 

 gängig, die Schnitte direkt in die Lösung einzulegen; nach verschiedenen Ver- 

 suchen gelangte ich zu folgendem Verfahren: Der Gefrierschnitt wird direkt 

 vom Messer des Mikrotoms weg auf dem Objektträger aufgefangen, so daß 

 er möglichst glatt liegt. Es soll dabei nicht verschwiegen werden, daß es 

 viel Mühe und auch dann noch zahlreiche Schnitte kostet, bis es gelingt, 

 einen derselben glatt auf den Objektträger zu legen. Das Organ darf weder 

 zu wenig noch zu stark gefroren sein, damit der Schnitt ausgebreitet und 

 nicht gerollt von der Schnittkante des Messers herabhängt und so aufgefangen 

 werden kann. Hat man dies erreicht, so bleibt der Schnitt kurze Zeit auf 



