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214 VITÈ E SACCAROMICETI 
previamente sottoposto a sterilizzazione frazionata nella stufa di 
Koch, durante due ore, e in tre giorni di seguito. 
I tubi e recipienti, col loro mosto, sottoposti alla stessa steri- 
lizzazione frazionata, venivano conservati per lungo tempo (quin- 
dici giorni al minimo), prima di essere seminati, e ciò allo scopo 
di constatare la loro perfetta sterilizzazione. ' Prima della semina 
però, venivano sottoposti ad una ultima rapida sterilizzazione 
nella stufa di Koch. 
Allorchè, di necessità i recipienti anzidetti si dovevano aprire, 
venivano prima riscaldati nella parte superiore, per mezzo della 
tiamma a gas 0 ad alcool, secondo il caso, e la scottatura pro- 
cedeva oltre fino ad abbruciare anche la porzione esterna del 
tappo di cotone. Tale operazione si ripeteva anche sui recipienti 
stessi dopo rinchiusi. 
Ma circa al modo di raccogliere il materiale, dirò subito che 
il terreno, attirata di più la mia attenzione, presentò le mag- 
giori difticoltà nella raccolta. Per lo studio del terreno superficiale, 
la cosa è facilissima, eseguendosi la raccolta con cucchiai ste- 
rilizzati. 
Però le difficoltà si incontrano quando si deve giungere a 
profondità diverse, e nel caso nostro poi, essendo il terreno di 
natura sabbiosa, i granelli si facevano strada dalla superficie 
agli strati più profondi tra le pareti del perforatore. o trivella 
di Frenkel e quelle del foro scavato. 
Perciò, per garentirmi ancor più della possibilità di inquina- 
mento, ho adottato uno speciale strumento composto di un tubo 
di ottone che veniva immerso, sia lateralmente nelle pareti sia 
perpendicolarmente nel fondo di una fossetta scavata, togliendo 
terra a sufficienza fino alla profondità voluta. 
Il campione veniva preso dal terreno che stava all'estremità 
inferiore del tubo, il quale era stato introdotto nelle pareti o nel 
fondo della fossa e si aveva cura di raccogliere il materiale con 
un piccolo cucchiaio, in una porzione centrale, che non fosse 
stata a contatto colle pareti del tubo, che avrebbero potuto in- 
quinarsi nel percorso. 
SR Ho verificato con i prat operazioni che l ci nei tubi e re- 
cipionti era di 0 
