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1 kg Zuckerrübenwurzel, berechnet auf Trockensubstanz, ent- 
wiekelt innerhalb 100 Stunden insgesamt bei anaérober Atmung bei 
einer Temperatur von 20° C.: 
C,H,0, = 398g 
CG,H,OH = 10,32 „ 
CO; gil 906. 
welche Quantitäten sowohl in der Lösung als auch in der Wurzel 
gefunden wurden. 
Nachdem wir mit voller Sicherheit bei Abwesenheit sowohl der 
aéroben als auch der anaéroben Mikroben konstatiert haben, dass 
sich Milchsäure bildet und sie sich immer als wesentlicher Bestand- 
teil des anaéroben Stoffwechsels vorfindet, sind wir zur Isolierung 
der Enzyme geschritten, welche die Milchsäurebildung im Pflanzen- 
organismus verursachen. ei der Isolierung derselben aus den 
diversen Pflanzenorganen .sind wir in folgender Weise vorgegangen: 
Die betreffenden Organe wurden zu feinem Brei zerrieben und zu 
diesem, im Gewichte von etwa 2—3 kg, ein kleines Quantum aus- 
geglühten und ausgekühlten, scharfkantigen Sandes gemischt. Diese 
Mischung wurde in Portionen von je 300 g in einer Zerreibungsvor- 
riehtung abermals gut zerrieben, so dass die Zellen der Pflanzen- 
organe gründlich zerrissen wurden, wovon wir uns dureh die mikro- 
skopisehe Untersuchung überzeugt haben Der auf diese Art er- 
haltene Brei wurde sofort bei einem Drucke bis zu 350 Atmospháren 
ausgepresst. Zu dem Safte, weleher von den Gewebsteilen und Zellen 
vollständig frei war, wurden absoluter Alkohol und Äther solange 
hinzugefügt, als die Bildung eines Niederschlages wahrzunehmen war. 
Auf 300 ccm Saft setzt man 500 cem Alkohol zu und dann unmittelbar 
500 cem Äther. Der Füllung des das Enzym enthaltenden Nieder- 
schlages erfolgt in hohen Glaszylindern. Nach der Auscheidung des 
Niederschlages und dem darauf folgenden Abgiessen des grössten Teiles 
der über demselben stehenden Flüssigkeit, wird ebensoviel Ather, 
als vorher Alkohol und Äther zur Fällung verwendet wurde, auf- 
gegossen. Sodann wird die stehenbleibende Flüssigkeit rasch abge- 
hebert und der Niederschlag selbst sofort mittelst Saugpumpe filtrie 4 
Die ganze Operation muss in wenigen Minuten beendet sein, da ns- 
besondere durch eine über einige Minuten dauernde Wirkung des 
Alkohols und Äthers das isolierte Enzym an Gärkraft ungemein 
einbüsst. Je schneller wir arbeiten, eine desto grössere Gärungs- 
energie zeigt uns das Enzym. Nach der Filtration wird der han 
schlag im Vakuumtrockenapparate bei einer Temperatur von 25 —90 s 
getrocknet. Hierauf wird die trockene, hornartige Substanz Zu — 
feinen Pulver zerstossen und sofort zum Studium der Gärung yos 
wendet. Der pulverfórmige Niederschlag wurde behufs Studiums r E 
10 pCt. Glukose-, Fruktose-, Galaktose-, Maltose-, Saccharose- -— 3 
Laktoselösung getan und 1— 2 pCt. Toluol zugesetzt. 
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