19 ALBERT SCHNEIDER: 
züchten, das heisst, sozusagen, ich versuchte die Rhizobien unter 
wurzelknöllchenartigen Umgebungen zu züchten. In den Knöllchen ist 
das Rhizobium folgenden Hauptbedingungen ausgesetzt: 1. Es nährt 
sich von einer pflanzlichen Nährlösung. 2. Diese Nährlösung hat eine 
saure Reaction. 3. Es lebt und vermehrt sich im Dunklen. — Ueber 
die Bereitung der Nährlösungen will ich an dieser Stelle nicht in die 
Einzelheiten eingehen. Ich gebrauchte Pflanzenextracte mit Agar, 
welche ich auf folgende Weise herstellte: Ungefähr '/, kg der rein- 
gewaschenen Wurzeln oder von Stamm mit Blättern wurde fein zerhackt 
und dann mit 1 Liter destillirtem Wasser 24 Stunden ausgelaugt. Die 
breiartige Masse wurde dann tüchtig ausgepresst und genügend Agar zur 
Flüssigkeit gethan, um ihr eine gallertartige Consistenz zu geben. Die 
Lósung war nun, nachdem sie filtrirt war, zum Gebrauche fertig. Ich fand, 
dass Wurzelextracte eine saure Reaction hatten, Stamm- und Blätter- 
extracte noch mehr als Wurzel. Für jede Rhizobienart stellte ich eine 
eigene Nährlösung her. Um z. B. das Rhizobium der Melilotus albus- 
Knóllchen zu züchten, gebrauchte ich Melilotus albus-Extracte (Wurzel 
und Stamm mit Blättern). Ich machte auch neutrale und schwach 
alkalische Lösungen, indem ich Natroncarbonat hinzufügte. Noch andere 
wurden mit veschiedenen Quantitäten Peptonum, Pancreatin, Zucker, 
Salz u. s. w. versetzt. 
Da einige Forscher behaupteten, Culturen der sogenannten Bac- 
teroiden (Rhizobium mutabile) bekommen zu haben, glaubte ich, dass es 
mir nicht schwer fallen würde, Rein- oder annühernd Reinculturen der- 
selben zu erhalten. Darin fand ich mich aber sehr getäuscht. Kürzlich 
hat ATKINSON!) über Bacteroiden berichtet. Er behauptet, Culturen 
in Vicia-Extract bekommen zu haben. Genaueres über Reinculturen, 
Wachsthumsfähigkeit u. s. w. bleibt in seiner Mittheilung aus. 
Die ersten Culturversuche stellte ich mit Rhizobium mutabile von 
Melilotus albus an. Dieser Pilz ist mit dem Rhizobium verschiedener 
Trifolium-Arten identisch, nur erleidet er keine so grossen Form- 
 veründerungen — der Wurzelknöllchen. Ich trug die Rhizobien 
aus völlig er , gesund aussehenden Knöllchen auf Melilotus 
albus-Wurzelextract mit Agar über. Dass dabei grosse ‚Vorsicht er- 
forderlich ist, um das Eindringen fremder Organismen zu verhindern, 
ist selbstverständlich. Die geimpften Nährlösungen wurden in Reagens- 
gläsern in ein dunkles Zimmer gestellt. Die Temperatur war die ge- 
wöhnliche Sommertemperatur des Laboratoriums. In drei bis vier 
Tagen bemerkte ich in den Wurzelagar-Lösungen eine kleine weiss- 
liche, etwas zähe, erhöhte Cultur. Die Untersuchung ergab, dass keine 
oder nur wenige zerstreute Bacteroiden anwesend waren. Die Masse 
der Cultur bestand aus geraden, ungefähr zwei bis drei Mal so lang 
E Bot. € Gazette, May, June, Tuy 1893. 
