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P. S. CHEN, E. KUBLI UND F. HANIMANN 



getrocknet worden war, wurde dièses nochmals mit 96%igem Âthanol besprùht, 

 um das iïberschùssige Hypochlorit zu entfernen. Nach dem Wegdampfen des 

 Âthanols erfolgte das letzte Besprùhen mit einem Gemisch bestehend aus einer 

 1 %igen Stârkelôsung und einer 1 %igen Kalium-jodidlôsung im Verhâltnis 1 zu 1. 

 Aile Peptidflecken ergaben eine deutlich dunkelblaue Farbe. Da dièse Farbe nicht 

 stabil ist, wurde das Pherogramm nach der Stârke-Jodid-Behandlung sofort 

 photographiert. 



Um die Identifizierung der bei der Hochspannungselektrophorese beobach- 

 teten Peptide zu erleichtern, wurden zusàtzliche Ioneaustausch-chromatogra- 

 phische Untersuchungen der Hàmolymphe und Extrakte durchgefuhrt. Fur eine 

 ausfuhrliche Beschreibung des vorliegenden Verfahrens verweisen wir auf die 

 fruheren Angaben von Chen (1963) und Chen et al. (1965, 1967). 



Ergebnisse 



Die elektrophoretische Auftrennung der freien Aminosàuren und Derivate 

 in der Larvalhâmolymphe von Phormia ist in Abbildung 1 dargestellt. Das obère 

 Pherogramm (A) zeigt das Muster aller Ninhydrin-positiven Komponenten; 

 diejenigen Flecken, die eine positive Reaktion bei der Hypochlorit-Stàrke-Jodid- 

 Behandlung aufweisen, sind auf dem unteren Pherogramm (B) deutlich zu sehen. 

 Einige basische Peptide, die bei pH 1,5 schnell zur Kathode wandern, sind beson- 

 ders konzentriert. Trotz ihrer hohen Konzentration bilden sie scharf aufgetrennte 

 Flecken. In der Nàhe des Startpunkts befindet sich ein schwach konzentriertes 

 Peptid; dièses ergab keine Ninhydrinfàrbung, konnte aber nach dem Peptidtest 

 einwandfrei lokalisiert werden. Wie Abbildung 1 B zeigt, stellten wir ausser den 

 Peptiden nach der Behandlung mit Hypochlorit-Stârke-Jodid ebenfalls eine posi- 

 tive Reaktion bei Glutamin, Methioninsulfoxyd und Phosphoâthanolamin fest. 

 Auf die Spezifitàt des Peptidtests werden wir noch zuriickkommen (siehe S.-). 



Das Yorkommen von hoch konzentrierten basischen Peptiden in der Phormia- 

 Hâmolymphe wurde durch Ionenaustausch-chromatographische Analyse bestàtigt. 

 Wie aus Abbildung 2 ersichtlich ist, konnten mindestens 16 verschiedene Peptide 

 im Bereich der basischen Aminosàuren eluiert werden. Im allgemeinen stimmt das 

 Muster mit dem fruheren Ergebnis von Levenbook(1966) gut iiberein mit 

 Ausnahme des /-Alanins, welches in der von uns untersuchten Probe in viel 

 geringerer Konzentration auftrat. 



Um die Frage zu priifen, inwiefern die auf unserem Pherogramm identifi- 

 zierten Peptidflecken den von Levenbook (1966) beschriebenen Peptiden entspre- 

 chen, wurde eine weitere Fraktionierung durchgefuhrt. Die Hàmolymphe-Probe 

 wurde auf eine Dowex-50 (4 x )-Sâule aufgetragen und mit einem Gradienten- 

 puffersystem bestehend aus Ammoniumformiat und Ammoniumacetat eluiert 



