PROTEINSYNTHESE DES WILDTYPES UND DER LETALMUTANTE 



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ijia die von ihnen angewendete Méthode ungeeignet ist, die wechselseitigen 

 Beziehungen zwischen DNS und RNS einerseits und zwischen RNS und Protein- 

 iynthese andererseits abzuklàren. 



Besonders aufschlussreich sind neuere Untersuchungen iiber das Muster 

 ■and die Synthèse der einzelnen RNS-Typen (Weideli, 1971). Larven des Wildtyps 

 [j.ind der Mutante wurden auf sterilem Médium aufgezogen und in geeigneten 

 i-Stadien mit 32 P-Orthophosphat pulse-markiert. Nach Phenolextraktion wurde 

 die RNS mittels Dichtegradienten-Zentrifugation und Polyacrylamidgel- Elektro- 

 bhorese analysiert. Es zeigte sich, dass der Einbau des Phosphats in die RNS im 

 tallgemeinen geringer ist bei den 1(3) /r-Homozygoten als bei +/+-Larven des 

 !;întsprechenden Entwicklungsalters. Kurz vor der Verpuppung wird die Synthèse 

 :iller RNS-Typen bei den Letalen vollstândig gehemmt, wâhrend die RNS- 

 tFraktionen des Wildtyps noch eine bedeutende Markierung aufweisen. Von be- 

 isonderem Interesse sind diejenigen RNS-Fraktionen, die sich nach der Gelelektro- 

 ■phorese in der Région zwischen 5 S und 18 S befinden. Ihre Markierung ist 

 pereits eindeutig bei 3-tâgigen -f-/+-Larven und erreicht ein Maximum am 4. 

 ÏI~ag. Hingegen ist die Markierung dieser Fraktionen bei 1(3) fr-Larven am 3. 

 ïjag am stârksten, und sinkt danach bis zur Verpuppung stândig ab. Es scheint. 

 fiass Larven des Wildtyps bedeutend langer RNS aus diesen Gelbereichen 

 »,;ynthetisieren als die Letalen. Nach Angaben fruherer Autoren und aufgrund der 

 (îohen Radioaktivitàt bei der Pulse-Markierung handelt es sich hier wahrschein- 

 [ ich um mRNS. Die vorliegenden Befunde gaben uns Anlass, die Leistungen der 

 ijîinzelnen an der Proteinsynthese beteiligten Komponenten in einem zellfreien 

 System zu priifen. 



In dieser Arbeit werden die folgenden Abkiirzungen gebraucht: AMP = 

 Adenosinmonophosphat, ADP = Adenosindiphosphat, ATP = Adenosintri- 

 phosphat, GTP = Guanosintriphosphat, PTC = Phenylthioharnstoff, DTT = 

 iDithiothreitol, EDTA = Aethylendiamintetraessigsàure, DNS = Desoxyri- 

 Iponukleinsâure, m RNS = Messenger RNS, Leu = Leucin, Val = Valin, 

 jMa = Alanin, Arg = Arginin, AspN = Asparagin, Cys = Cystin, Gly = 

 plycin, Glu = Glutaminsàure, GLuN = Glutamin, Met = Methionin, Tyr = 

 jryrosin, Phe = Phenylalanin, His = Histidin, lieu = Tsoleucin, Thr = 

 rhreonin, ProOH = Hydroxyprolin, Pro = Prolin, Try = Tryptophan, 

 Lys = Lysin. 



Material und Méthode 



Dreistundige Gelege von Drosophilalarven des Wildstammes „Sevelen" 

 Uwie /^^/-//("ij/r-Homozygoten aus der Kreuzung l(3)tr Ubx/TM V Mé 

 7 sbd £ X 1(3 )tr Sbjln (3L) P + (3R) P18, Mé Ubx wurden auf 

 iynthetischem Médium unter steriler Bedingung bei 25° C aufgezogen. Die Ribo- 



