PROTEINS YNTHESE DES WILDTYPES UND DER LETALMUTANTE 



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1 g Larven 



2,5 ml Médium A 



0,005 ml PTC 



0,004 m DTT 



1°/ TRITON-X-100 



2 min homogenisieren bei °C 

 1 



15.000 x g (15 min) 



ùberstehende Losung 

 1 : 1 verdùnnt mit 

 Médium B. 

 1 



105.000 x g (60 min) 



Sédiment 

 (verworfen) 



iberstehende Losung — 21/2 Vol 

 Med. B, dann mit 1 N HAc auf pH 

 5,3 bringen bei °C 



6.000 x g (15 min) 



(iberstehende 

 Losung — 4 Vol. 

 hesàtt. Ammon- 

 umsulfatlosung 



i 



10.000 x g (20 min) 

 i 1 



Niederschlag dialy- 

 pert gegen Med. A 

 120 min). 



I 1 



|pH- 5,3- uber- 

 ;stehende Enzyme 



Sédiment in 

 0,01 m NaAc (pH 

 5,3) resuspend- 

 ieren 



6.000 x g (15 m in) 

 1 



pH-5,3-Enzyme 



Microsomensedimet in 0,5 ml 

 5% Na-deoxycholat resuspendiert 

 bei C C, 10 min stehen lassen, 

 bei — 4 °C, Zugabe von 2,5 ml 

 Med. A r 2 ml Med. B. 



105.000 x g (60 min) 



Ribosomen in 

 1 ml Med. A - 

 4 ml Med. B 

 resuspendieren 



ùbersteh. 



Losung 



(verworfen) 



105.000 x g (60 min) 



Ribosomen 



ùbersteh. 



Losung 



(verworfen) 



i verwendeten Enzymproteine quantitativ verschieden zusammengesetzt sind. 



fm l(3)tr-System sind die Fraktionen 5 und 6 relativ konzentrierter als im 

 +/— -System, wàhrend fuir die Fraktion 8 das umgekehrte der Fall ist. Das am 

 Startpunkt liegengebliebene Material besteht vor allem aus Ribosomen und 

 Polysomen. Die darin vorhandene hohe Aktivitàt stammt wahrscheinlich von 

 neusynthetisierten Proteinen, die nicht von den Polysomen abgelôst wurden. 

 Fur die ubrigen Fraktionen ist ein deutlicher TJnterschied des Markierungs- 

 musters zwischen den beiden zellfreien Systemen feststellbar. Im ganzen zeigt das 



