RNS-SYNTHESE BEI DROSOPHILALARVEN 



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ausgefâllt (Endkonzentration 5%). Der Niederschlag wurde in 400 \i\ 0,01 m 

 NaAc aufgenommen und auf ein Planchet aufgetragen. Die Messung der Radio- 

 aktivitàt erfolgte in einem Gasdurchflusszahler mit Fenster D 47 von Nuclear 

 Chicago. 



b) Nach Polyacrylamidgel- Elektrophorese: Die Gele wurden in der Tief- 

 kûhltruhe eingefroren und anschliessend mit einer Rasierklinge in diinne Scheiben 

 geschnitten. Die Scheiben wurden in 400 [xl 30%igem H 2 2 bei 70° C aufgelôst 

 und anschliessend auf ein Planchet aufgetragen. Die Messung erfolgte gleich wie 

 oben. 



Ergebnisse und Diskussion 



Unsere Ergebnisse iïber die Fraktionierung der RNS mittels Dichtegradien- 

 ten-Zentrifugierung sowie ihre Synthèse durch Markierung mit 32 P sind in Abbil- 

 dung 1 zusammengestellt. In allen bisher untersuchten Larvenstadien wurde eine 

 scharfe Auftrennung der 18S- und 28S-Komponenten der ribosomalen RNS 

 (rRNS) erzielt. Im niedermolekularen Bereich fanden wir stets eine starke Akku- 

 mulation von Substanzen, die grosstenteils durch eine 2 stiindige Dialyse entfernt 

 werden konnten. Es handelt sich hier wahrscheinlich um Verunreinigungen der 

 RNS und Oligo- und Polynucleotide, die durch die Behandlung der DNS mit 

 DNase entstanden sind. Wie unten noch beschrieben wird, konnte das Vor- 

 kommen von 4S- und 5S-RNS mit Hilfe der Polyacrylamidgel-Elektrophorese 

 einwandfrei nachgewiesen werden. Ferner zeigten die Messwerte der Absorption 

 bei 260 nm eine deutliche Zunahme der beiden 18S- und 28S-Komponenten 

 zwischen 2. und 4. Tag des Larvallebens. Erst in den verpuppungsreifen Larven 

 nehmen sie in ihrem Gehalt leicht ab. 



Die relative Radioaktivitât der rRNS ist besonders hoch in den 2 tâtigen 

 Larven, was auf ihre rasche Synthèse hindeutet (siehe Abb. 1). Im Gegensatz 

 zum Totalgehalt sinkt die Markierung der 28S- und 18S-RNS im Laufe der Lar- 

 valentwicklung stândig ab, sodass im Alter von 5 Tagen nahezu kein Einbau von 

 32 P erfolgt. 



Das Sedimentationsprofil der RNS-Markierung deutet darauf hin, dass 

 hochmolekulares Material in 2 und 5 Tage alten Larven synthetisiert wird. 

 Nach Brown und Littna (1964), die die RNS-Synthese in der Embryonalent- 

 wicklungvon Xenopus laevis eingehend untersuchten, handelt es sich hier vermutlich 

 um ein Gemisch von DNS-âhnlicher RNS und Vorstufen der rRNS mit einer 

 Sedimentationskonstante von 45S. Die hohe Radioaktivitât im Bereich von 4S 

 und 5S ist, wie bereits erwâhnt, mindestens zum Teil auf die Akkumulation von 

 Nucleotiden und Verunreinigungen zurùckzufùhren. 



Im ganzen stimmen unsere Ergebnisse gut ùberein mit denjenigen von 

 Church und Robertson (1966), die die RNS-Synthese der Drosophilalarven 

 unter vergleichbarer Bedingung analysiert haben. Lediglich stellten die beiden 



