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A. SCHOLL UND H. M. EPPENBERGER 



liert ist mit variierenden Chromosomenzahlen und DNA-Gehalten der Génome 

 der untersuchten Fische. 



Methodisches 



Wir verwendeten fur unsere Untersuchungen je mindestens 10 ausgewachsene 

 Tiere beiderlei Geschlechts der folgenden Arten: Puntius schwanefeldi (Schwanen- 

 feld-Barbe), Carassius auratus (Goldfisch), Salmo trutta f. fario (Bachforelle), 

 Xiphophorus helleri (Schwerttràger). Unmittelbar nach der Tôtung der Tiere 

 wurden folgende Organe entnommen und in 3 Volumen 10% Saccharose homo- 

 genisiert: Herz, Hirn, Muskel, Magen, Darm, Gonaden, Leber, Niere. Nie wurden 

 Organe mehrerer Tiere gepoolt. Von den Homogenaten gewannen wir durch 

 Zentrifugation mitochondrienfreie Homogenatuberstànde, die auf 1.5% Agarose- 

 platten (10 X 10 cm) aufgetrennt wurden. Bei jeder Spezies wurden verschiedene 

 Puffersysteme im Trenngel verwendet (Veronal, pH 8.6, 0.02 M und 0.03 M und 

 Citrat-NaOH-PufTer, pH 6.5, 0.01 M), ebenfalls variierten wir die Auftrennungs- 

 zeit (20 Min. bis 2 Std. bei 30-40 mA). Die speziellen Versuchsbedingungen sind 

 jeweils unter den entsprechenden Abbildungen angegeben. Bis zu diesem Pràpara- 

 tionsschritt wurde unter Kùhlraumbedingungen gearbeitet (4° C). 



Zur Sichtbarmachung der Kreatin Kinasen auf den Trenngelen ùberschichte- 

 ten wir nach beendeter Elektrophorese das Trenngel mit einem zweiten Gel, welches 

 spezifische Reagentien zum Nachweis der Kreatin Kinase enthielt. Wir benutzten 

 hiezu alternativ eine mehrfach ausfuhrlich beschriebene Méthode (Dawson et al., 

 1965, 1967; Scholl, 1969) oder eine Modification der Méthode von Burger et 

 al., 1964. In diesem Falle lagen die zur Sichtbarmachung der Kreatin Kinase 

 notwendigen Reagentien im Detektorgel in folgenden Konzentrationen vor: 

 Glycin-NaOH-PufTer, 0.2 M, pH 9.0; Mg ++ 5 mM; ATP 3.3 mM; Phosphoenol- 

 pyruvat 2.4 mM; NADH 1.5 mM; Pyruvat-Kinase 20 mg/1; Lactat-Dehydro- 

 genase 25 mg/1 ; Kreatin 4 g/1. Der Blindwert enthielt kein Kreatin. 



Die mit dem Detektorgel ùberschichteten Trenngele wurden im Wàrme- 

 schrank bei ca. 40°C inkubiert und nach 30 und 60 Min. fotografiert. Hiezu 

 wurden die mit dem Detektorgel ùberschichteten Elektrophoreseplatten auf Agfa- 

 Lupex LN 1 Kopierpapier gelegt und von einer Camag-UV-Lampe (350 mu.) aus 

 ca. 1 m Abstand belichtet. 



Resultate 



Bei der Schwanenfeld-Barbe (Fig. 1) konnten wir unter verschiedenen 

 Auftrennungsbedingungen stets nur gesamthaft drei Isoenzymbanden beobachten. 

 Diesc Isoenzyme weisen organspezifische Verteilungsmuster auf. Nur in wenigen 

 Fâllen konnte in einem Organ die Anwesenheit aller drei Isoenzyme nachgewiesen 

 werden. Nur drei Kreatin Kinasen scheinen auch verschiedene andere Cypriniden 

 zu besitzen, Schleie, Rotauge, Alel und Griindling, wobei sich gegenuber der 



