400 Leonhard Scheben, 



Untersuchungsmethoden. 



Da es nicht leicht ist, brauchbare Präparate zu erhalten, so gebe ich die 

 von mir angewandten Methoden etwas genauer an. 



Männliche wie weibliche Geschlechtsorgane werden aus dem lebenden Tiere 

 so schnell als möglich herauspräpariert, nachdem man dasselbe, ohne es in ein 

 feuchtes Medium zu bringen, in einer Wachsschale fixiert hat. Dann werden 

 die Organe in die Konservierungsflüssigkeit geworfen. Mit dem Lospräparieren 

 von Darmteilen hält man sich zweckmäßig nicht lange auf; dieselben lassen sich 

 später sehr leicht entfernen, ohne daß die Güte des Präparates Einbuße erleidet. 



Zur Konservierung wurde mit Vorteil benutzt vor allem ein Gemisch von 

 50 Teilen »Alcoholus absolutus«, 50 Teilen Quecksilberbichlorat und 2 Teilen 

 Eisessig, ferner die von Boveri empfohlene Pikrinessigsäure ; auch die Zenker- 

 sche Lösung tat gute Dienste. 



Das Material, das zweckmäßig in kleinere Teile zerschnitten ist, wurde 

 durchweg 3 bis 4, auch ohne Schaden selbst 12 Stunden in der Konservierungs- 

 flüssigkeit belassen, dann in 60°/ igen Alkohol nach der eventuellen Entziehung 

 des Quecksilbers durch Bindung mit Jod ausgewaschen und allmählich in höher 

 prozentigen Alkohol übergeführt bis in absolutem Alkohol, in dem man das 

 Material nicht zu lange liegen lassen darf, die nötige Härtung erreicht ist. 



Danach werden die Objekte in Xylol oder besser in reines Chloroform 

 gebracht, und, da sie vermöge ihres geringen spezifischen Gewichts die Ober- 

 fläche dieser Flüssigkeit überragen und so durch den Luftzutritt geschädigt 

 werden können, durch eine Schicht absoluten Alkohols von der äußeren Luft 

 getrennt. Nach genügender Durchtränkung des Objekts zieht man mit der 

 Pipette den Alkohol vorsichtig ab und überträgt das Material von neuem in 

 reines Chloroform oder Xylol, worin es, wenn kein Fehler gemacht wurde, 

 alsbald untersinkt. Nach kurzer Zeit, etwa einer halben Stunde, wird es in ein 

 Gemisch von Xylol- bzw. Chloroform-Paraffin gebracht und dann nach einer 

 halben Stunde in reines Paraffin eingebettet. Die Einbettungsdauer beträgt in 

 der Eegel 4 Stunden bei etwa 60° C. 



Die Dicke der verwendeten Schnitte beträgt 4 — 10 t u. 



Gute Färbungen wurden erzielt mit der HEiDENHAiNschen Hämatoxylin- 

 methode. Auch Doppelfärbungen dieser Methode mit einer beliebigen Plasma- 

 färbung, wozu sich nach meinen Erfahrungen Lichtgrün besonders gut eignet, 

 fielen zur Zufriedenheit aus. Einfache Pikrokarmimärbungen taten speziell bei 

 der Untersuchung der Spermatiden gute Dienste. Außerdem wurden Färbungen 

 mit Anilinfarb Stoffen und Doppelfärbungen von Heidenhain schem Hämatoxylin 

 und Bordeauxrot angewendet. 



Außer an Schnitten machte ich Beobachtungen an Totalpräparaten, indem 

 ich entweder den Inhalt frischer Geschlechtsorgane lebender Tiere mittels des 

 heizbaren Objekttisches in Eiweißglyzerin oder einer schwachprozentigen Zucker- 

 lösung betrachtete oder den auf dem Objektträger ausgepreßten Inhalt durch 

 Osmiumsäuredampf konservierte oder das auf anfänglich beschriebene Weise 

 konservierte Material behandelte, wie dies von van Beneden und Boveri an- 

 gegeben wurde, und es in Glyerin einschloß. Ich finde indes, daß man nach 

 Entziehung des Alkohols durch Xylol und Einschließen in Kanadabalsam minde- 

 stens ebenso gute Bilder ohne merkliche Schrumpfung bei genügender Vorsicht 

 erhalten kann. 



