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Anton Wierzejski, 



längerer Einwirkung der Salzlösung mehr oder weniger aufquellen, empfiehlt 

 Holmes, derselben einige Tropfen der Fixierungsflüssigkeit zuzusetzen. Ich 

 habe diese Methode versuchsweise angewendet, konnte aber die Auflösung des 

 Eiweißes ohne Schädigung des Keimes nicht zu stände bringen. Praktischer 

 dürfte das von Child empfohlene Verfahren sein, welches darin besteht, daß 

 die Gallerte erst nach Fixierung in einem beliebigen Säuregemisch (Chromsäure- 

 gemische ausgenommen) und nach Härtung in Alkohol aufgelöst wird. Nach 

 seiner Erfahrung löst sich dieselbe in jeder sehr verdünnten Säure auf. Da 

 jedoch das in den Eikapseln enthaltene Eiweiß nach der Härtung nicht löslich 

 ist, so habe ich diese Methode für Physa bloß dann anwenden können, wenn 

 es sich um ein zum Schneiden bestimmtes Material handelte. 



Für meine Untersuchungen habe ich daher hauptsächlich ein in der oben 

 angegebenen Weise in PERENYischer Flüssigkeit fixiertes Material verwendet, 

 weil es sich zum Studium der Zelldescendenz ganz besonders eignet. Es treten 

 nämlich an gelungenen Präparaten alle gewünschten Details, wie Zellgrenzen, 

 Kerne, Mitosen, Zwischenkörper u. dgl. mit großer Klarheit und Schärfe hervor 

 und zwar sowohl im Oberflächenbilde als auch in den tieferen Schichten der 

 Embryonen. 



Zur Tinktion der Präparate habe ich vorwiegend kristallinisches Häma- 

 toxylin gebraucht. 



Neben dem kristallinischen wurde auch öfter das DELAFiELDsche Häma- 

 toxylin verwendet und zwar sowohl in neutraler als auch in einer sehr schwach 

 augesäuerten Lösung. Letztere wird sowohl von Conklin als auch von Holmes 

 sehr warm empfohlen und liefert in der Tat ganz hübsche und dauerhafte Tink- 

 tionen, wenn die Präparate in KLEiNENBERGscher Pikrinschwefelsäure fixiert 

 worden sind. Weniger empfehlenswert habe ich diese Tinktionsmethode für 

 Physa gefunden, deren Laich in PERENYischer Flüssigkeit fixiert wurde. Das 

 saure Hämatoxylin gibt nämlich besonders bei älteren Furchungsstadien deshalb 

 keine günstige Färbung, weil es die im Plasma enthaltenen Eiweißkügelchen 

 ebenfalls färbt, wodurch das Präparat an Durchsichtigkeit einbüßt. Die er- 

 wähnten Eiweißelemente kommen auch in dem Falle störend zum Vorschein, 

 wenn man die mit DELAFiELDschem Hämatoxylin tingierten Präparate mit 

 saurem Alkohol nachbehandelt. 



Es braucht kaum hervorgehoben zu werden, daß man sich bei embryo- 

 logischen Untersuchungen mit einer einzigen oder zwei Tinktionsmethoden nicht 

 begnügt, sondern der beabsichtigten Wirkung entsprechend deren mehrere in 

 Anwendung bringt, zumal für Schnitte. Doch selbst die exakteste Tinktion 

 läßt zuweilen den Embryologen im Stich und man ist genötigt, zur Metall- 

 imprägnation zu greifen. 



Es wurde namentlich von Holmes (1900) in dessen Untersuchungen über 

 Planorhis die Silbernitratmethode fleißig und mit gutem Erfolg angewendet, 

 was mich veranlaßt hat, seinem guten Beispiel zu folgen. Holmes verfährt 

 folgendermaßen. Er überträgt die Eier aus den Eikapseln direkt in eine 

 0,750/0 ige Silbernitratlösung, setzt sie in einem Uhrschälchen durch längere 

 Zeit dem direkten Sonnenlicht aus, kontrolliert von Zeit zu Zeit unter dem 

 Mikroskop und sobald das Mosaik der Zellengrenzen mit gewünschter Schärfe 

 zum Vorschein kommt, spült er das Präparat mit destilliertem Wasser gehörig 

 ab, setzt einige Tropfen von 0,50 oiger unterschwefliger Natriumlösung auf bloß 

 3 — 4 Sekunden hinzu, damit der Silberniederschlag nicht ganz aufgelöst werde, 

 und wäscht schließlich mit konzentrierter Pikrinsäure aus. Diese dient zugleich 



