Untersuch, über den feineren Bau des Nervensystems der Ascidien. 215 



den umgebenden Geweben, da das Gehirn vor allen Dingen den Farb- 

 stoff schwer aufnimmt. Mit der Zeit gelang es mir jedoch, die richtige 

 Zeitdauer und Konzentration der Färbung herauszubekommen, so daß 

 die Präparate ziemlich gleichmäßig gefärbt waren. Auch die fertigen 

 Präparate scheinen mit der Zeit noch etwas zu verblassen. 



Große Schwierigkeit bereitet die Darstellung des Plasmas der 

 Ganglienzellen bei den Ascidien, da dasselbe sehr schwer den Farbstoff 

 annimmt. Die besten Resultate erzielte ich hier mit der Hämatoxylin- 

 Orange G-Färbung, und zwar empfiehlt es sich, mit Orange G recht 

 intensiv zu färben, so daß das Hämatoxylin fast ganz verdeckt wird. 

 Mit Eosin, das ja auch ein specifisches Plasmafärbemittel ist, hatte ich 

 bei meinen Ascidien keinen Erfolg. Zu empfehlen ist auch die Doppel- 

 färbung mit Methylenblau (1 : 100) und Orange G. 



Gute Dienste leisteten mir ferner Osmium-Holzessig- Präparate. 

 Bei Anfertigung derselben benutzte ich zunächst 1 / 2 %ige Osmiumsäure. 

 Es stellte sich jedoch bald heraus, daß dieselbe schwer zu den centralen 

 Partien des Gehirns durchdringt, und gebe ich daher der l%igen Os- 

 miumsäure den Vorzug. Bei dem kleinen Gehirn der Styelopsis grossu- 

 laria beließ ich das Objekt 8 Stunden in l%iger Osmiumsäure und 

 darauf 4y 2 Stunden in unverdünntem Holzessig; bei dem größeren 

 Gehirn der Ascidia virginea blieb es 10 Stunden in Osmiumsäure und 

 5 Stunden in Holzessig. Bevor diese Präparate durch die Alkohole 

 geführt werden, sind sie gründlich auszuwaschen. 



Viel und mit bestem Erfolge habe ich bei meinen Untersuchungen 

 auch die Färbung mit HEiDENHAiNSchem Eisenhämatoxylin angewandt : 

 10 fi dicke Schnitte von der in Sublimat konservierten Styelopsis stellte 

 ich auf 10 Stunden in die Beize, eine 2 1 / 2 %igQ wässerige Lösung von 

 schwefelsaurem Eisenoxydammoniak. Nach Abspülen mit recht viel 

 destilliertem Wasser kamen die Schnitte auf 48 Stunden in das Häma- 

 toxylinbad, so daß sie vollständig schwarz wurden. Heidenhain gibt 

 hierfür eine Lösung an, bestehend aus: 



1 g Hämatoxylin, 



10 ccm Alkohol (95%igen habe ich verwandt), 

 90 ccm Aq. dest. 



Diese Lösung muß erst 4 Wochen stehen und wird zum Gebrauch 

 mit dem gleichen Quantum Aq. dest. verdünnt. Heidenhain empfiehlt, 

 die einmal benutzte Farbenquantität immer wieder, eventuell nach 

 vorherigem Filtrieren, zu gebrauchen. Eine tadellose Färbung soll 

 überhaupt erst bei mehrfach gebrauchten Lösungen eintreten. 



