VERDAUUNGSENZYM-AKTIVITATEN BEI DROSOPHILA-LARVEN 



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FiG. 1. 



Schéma zur Messung der Proteaseaktivitâl. 



25 Larven in 250 [x\ NaHCOa- Puffer 

 (1 %, pH 8,3; 0,001 M Phenylthioharnstoflf als Tyrosinasehemmer) 



I 



Homogenisation T bei 0' C 

 Zentrifugation 15' bei 9000 upm(SorvalI, Rotor SS34) 

 Uberstand dekantieren und zentrifugieren 15' bei 9000 upm 



I 



100 1^1 



^- 400 [xl NaHCOg-Puffer 

 <~ 500 [i] 2,5 % Azokasein 

 Inkubation 45' bei 37° C 



I < — 4 ml 5% Trichloressigsâure 

 Filtrieren 



1 :1 Verdûnnen 

 mit 0,5 N NaOH 



I 



I 



Messen bei 415 nm 



I 



I 



Proteasenaktivitât (K) 



i 



100 [i\ 



I 



Proteinbestimmung 

 mit Biuretreagens 



Proteingehalt 



C. Messung der Amylaseaktivitàt 



Stârke wird durch a-Amylase zu Bruchstiicken hydrolysiert (reduzierende 

 Zucker, z. Bsp. Maltose), deren reduzierende Hemiacetalgruppen mit Dinitro- 

 >alicylsàure bestimmt werden kônnen. Die Konzentration der entstandenen Nitro- 

 iminosalicylsâure wurde photometrisch gemessen; sie entspricht der Konzentra- 

 ion der neugebildeten Endgruppen und damit direkt der Enzymaktivitàt (Doane, 

 1969; Bergmeyer, 1970; Ishaaya und Swirski, 1970). 



Fiir die Bestimmung der Amylase-Aktivitât wurde nach dem in Figur 2 

 ingegebenen Schéma verfahren. 



I Die Amylaseaktivitâten werden heute allgemein in //M Maltose pro Minute 

 inkubation angegeben. Mit Hilfe einer Maltose-Eichkurve (0,1 mM Maltoselôsung) 

 vurden die gemessenen Absorptionen auf Maltose-Konzentrationen umgerechnet. 

 pa wir unsere Werte auf den Proteingehalt des Enzymextrakts bezogen haben, 

 crgibt sich als Einheit f.i mole Maltose/min/^g Protein. 



