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A. SPIRO-KERN UND P. S. CHEN 



deutlich, dass nicht Futteraufnahme allgemein die Ausschiittung der Protease 

 stimuliert, sondern dass im besonderen eiweisshaltiges Futter dazu benotigt wir 

 (siehe Diskussion in Chen 1971, S. 36 — 37). 



3. Elektrophoretische Auftrennung des Larventrypsins 



Die elektrophoretische Auftrennung des Darmhomogenats der MUckenlarve 

 im 7,5% igen Polyacrylamidgel ergab mindestens 13 Proteinbanden, die jedoc 



Rinder-Trypsin 2xcrist. Culex-Larven (Mitteldarm) 



2,5% 15% 2,5% 15% 



Abb. 3. 



Polyacrylamid-Elektrophorese von Rindertrypsin und Darmhomogenat von 8 tâgigen C. p 

 pipiens-Larvcn. Unten: Schematische Darstellung der Banden nach Fàrbung des Gelstreifen 

 mit Amidoschwarz. Mitte: Densitometrische Messung des ungefàrbten Gelstreifens. Oben 

 Trypsinaktivitàt in den entsprechenden Gelsegmenten. 



keine Trypsinaktivitàt aufwiesen. Wurde ein 15%iges Gel nach dem Verfahrer 

 von Reisfeld et al. (1962) verwendet, so liessen sich nur 2 Banden nachweiseni 

 die beim pH 4,5 zur Kathode wanderten. Dies beruht darauf, dass Eiweisse, dereri 

 Molekulargewicht iiber 30.000 liegt, nicht mehr in das Gel eindringen kônnen 

 Wie Abbildung 3 zeigt, konnten bei densitometrischer Aufzeichnung der unge-| 

 fârbten Gele bei 280 nm 2 deutliche Absorptionsmaxima festgestellt werden, die| 

 sich mit den amidoschwarzgefârbten Banden deckten. Unser Versuch mit reinemj 

 Rindertrypsin ergab ebenfalls 2 Banden, die sich jedoch etwas schneHer zurj 

 Kathode bewegten als diejenigen der Culexlarven, was auf die unterschiedliche 

 Proteinstruktur hindeutet. 



Die Extraktion der Proteinkomponenten a us diesen Gelregionen und die{ 

 anschliessende Enzymanalyse bewiesen, dass nur die stârkere, weiter gewanderte 



