1282 



PETER VOGEL 



sie bei kleinen, lebenden Objekten, da das Auflôsungsvermôgen bei der notwen- 

 digen kurzen Belichtungszeit zu gering ist. 



Fur kleinere Objekte, besonders Fôten und kleine Wirbeltiere bis Hamster- 

 grosse, eignet sich die Alizarinrotfârbung, eine Kalkdarstellung am durchsichtig 

 gemachten Totalprâparat. Viele Methoden sind beschrieben worden, die von 

 verschieden fixiertem Material ausgehend zum selben Ziel fiihren, z.B. fur formalin- 

 fixiertes Material bei Romeis (1968). Noch einfacher geht die Fàrbung nach einer 

 Fixierung mit Alkohol 90%. Zuerst wird das Prâparat in Kalilauge 1 % — 1 Tag) 

 gelegt. Danach erfolgt die Fàrbung in einer Losung von 0,1%^^ Alizarinrot S in 

 1 %-iger Kalilauge, bis die Knochenkerne sichtbar rot sind (ca. 1 — 2 Tage). Die 

 gefàrbten Prâparate werden in einer Losung von Kalilauge (1 Teil, 1 %-ig), 

 Glyzerin (20 Teile) und Aqua dest. (79 Teile) aufgehellt (1 — 7 Tage) und dann in 

 aufsteigender Konzentration in reines Glyzerin ûbergefuhrt. Grôssere Transparenz 

 wird erreicht, wenn die Prâparate statt in Glyzerin via Alkohol abs. iiber Benzol 

 in Benzylbenzoat gefùhrt werden. Dabei schrumpfen jedoch die Prâparate stark, 

 so dass dièse Méthode mit entscheidenden Mângeln verbunden ist. Die Abbil- 

 dung 33 wurde deshalb, um den Schrumpfungseffekt auszugleichen, nachtrâglich 

 wieder auf die urspriinglichen Grôssenverhâltnisse gebracht. 



Es ist zu beachten, dass durch Alizarinrot auch der verkalkte Knorpel 

 angefârbt wird. Da dem histologisch echten Verknocherungsprozess ein Stadium 

 verkalkten Knorpels vorangeht, ist es eine Frage der Définition, ob man den 

 Anfang der Ossifikation in diesen oder jenen Augenblick der Entwicklung verlegt. 

 Definieren wir wie Pétri (1935) den Beginn mit der Fârbbarkeit durch Alizarin- 

 rot, dùrfen wir die Resultate direkt mit jenen vergleichen, die durch die Rôntgen- 

 technik gewonnen werden, da auch dièse bereits den verkalkten Knorpel anzeigt. 



Fur genauere Untersuchungen zum Ossifikationsverlauf sind histologische 

 Schnittserien unerlàsshch, da mit ihrer Hilfe auch das nichtverknôcherte Gewebe 

 und der Zustand der Gelenke beurteilt werden kann. Insbesondere lâsst sich der 

 Schluss der Epiphysenfugen nur im histologischen Prâparat genau verifizieren. 

 Andererseits ist es schwer, im entkalkten Prâparat den verkalkten Knorpel zu 

 bestimmen. Der spezielle Kalknachweis fur entkalktes Gewebe nach Erôs (1928) 

 brachte keine befriedigenden Ergebnisse. Der verkalkte Knorpel ist im fort- 

 geschrittenen Stadium zwar an den degenerierten Zellkernen zu erkennen, bei 

 seinem ersten Auftreten ist er, wie ein Vergleich mit Alizarinrotprâparaten zeigte, 

 jedoch nicht zu verifizieren. Es wurde deshalb vermieden, Befunde von histolo- 

 gischen Prâparaten mit solchen zu vergleichen, die an aufgehellten Totalprâparaten 

 gewonnen wurden. 



Das Material wurde in Bouinscher Losung nach der Modifikation von 

 Dubosq-Brasil (Romeis, 1968) fixiert und mit Trichloressigsâure (5%) entkalkt. 

 Um eine optimale Lage der Knochen zu erhalten, empfiehlt es sich, die Pfôtchen 

 nach der Entkalkung zwischen zwei Objekttrâger einzuklemmen und in dieser 



