Ossewasioni e considerazioni sulla presenza di bacilli acido-resistenti, ecc. 3 



semberger sopradescritto, e la modificazione recentemente portata da Zeissler al metodo 

 di Schnitter (V. Rumpf — loc. cit.) ma senza ottenere migliori risultati. 



Tecnica : Dalla vena mediana del braccio, con siringa di vetro, estraggo 2 cut' di sangue e lo verso di- 

 rettamente in una grossa provetta da centrifuga (capace di 40 cm :i ) contenente 8-10 cui 3 di soluzione di acido 

 acetico al 3 c '/o- 



Agito per qualche minuto, e dopo aver lasciato a contatto la miscela per 15-30' aggiungo 20-30 cm 3 di 

 acqua distillata e centrifugo in centrifuga elettrica (F. Rumne-3000 giri al m :) per 20-25'. 



Al sedimento di colorito rosso-cupo aggiungo, sempre nella stessa provetta, 10 cm 3 di antiformina al 40 °/ 

 ed agito la miscela per due tre minuti finché il sedimento si scioglie completamente ed il liquido diviene 

 limpido, trasparente, assumendo una tinta giallo-paglierina. 



Aggiungo allora 25-30 cm 3 di acqua distillata, e centrifugo una seconda volta per mezz'ora. 



Dopo la centrifugazione si osserva sul fondo della provetta uno scarsissimo sedimento biancastro, appena 

 visibile; decantato il liquido sovrastante, aggiungo al sedimento 30-40 cm 3 di acqua distillata e centrifugo un 

 ultima volta per 30-40'. 



Getto l'acqua di lavaggio, lasciando sul fondo della provetta tre quattro gocce di liquido; con un ba- 

 stoncino di vetro stacco dal fondo il sedimento ed agito ; verso infine le poche gocce di liquido su di un ve- 

 trino porta oggetti, e messo il preparato per qualche ora in termostato a 37" ad asciugare, lo fìsso alla fiamma 

 e procedo alla colorazione. 



Le varie operazioni devono preferibilmente essere eseguite di seguito senza interruzioni. 



Il contatto del sangue con l'acido acetico non deve essere troppo prolungato, e l' an- 

 tiformina deve rimanere a contatto del coagulo soltanto il tempo necessario perchè questo 

 venga sciolto completamente ; non appena la miscela è divenuta limpida ed ha assunto 

 il colorito giallo caratteristico si deve diluire con acqua e centrifugare. 



Ho provato diverse concentrazioni di antiformina , dall' antiformina intera usata da 

 Konashige alle debolissime diluizioni 10-15% adoperate dal Duschinoff. 



La diluizione optimum s'aggira secondo i risultati da me ottenuti, intorno al 40 % . 

 L' antiformina adoperata come tale , per la sua azione troppo energica può qualche volta, 

 come a me è capitato, non corrispondere allo scopo, e d' altra parte concentrazioni troppo 

 deboli devono stare molto tempo a contatto del coagulo, e spesso non riescono a scio- 

 glierlo completamente. 



Data la difficoltà di poter distinguere al microscopio i bacilli tubercolari dagli altri 

 acido-resistenti, la poca sicurezza che offrono per la differenziazione i metodi di colora- 

 zione, la possibilità come già fu dimostrato, della presenza di bacilli acido-resistenti nel- 

 l'acqua, mi sono circondato nelle mie ricerche di tutte le cautele necessarie per allontanare 

 il sospetto avanzato da taluno che i bacilli acido-resistenti potessero provenire dagli og- 

 getti adoperati od esistere nell'acqua stessa. Tutti glt utensili che servivano alla ricerca 

 (siringa, recipienti per H 2 0, provette da centrifuga, bastoncini di vetro, vetrini) venivano 

 lavati varie volte ed immersi per parecchio tempo prima in soda , poi in acido solforico, 

 in acqua, ed infine in alcool assoluto. L' acqua che serviva alle varie operazioni veniva 

 distillata, messa nei recipienti di vetro già puliti ed esaminata microscopicamente. La so- 

 luzione di antiformina filtrata doveva essere perfettamente limpida. 



Seguii la tecnica ora descritta anche per la ricerca dei bacilli acido-resistenti nel l' ori- 

 na, nel pus, nelle feci, negli essudati; variavo soltanto nei singoli casi il grado di con- 

 centrazione dell' antiformina. Per 1' orina e per gli essudati trattavo il sedimento con anti- 

 formina al 20%; il pus e le feci, stemperate in acqua e centrifugate, con antiformina 

 al 35 °/o. L'orina con abbondante sedimento e gli essudati molto corpuscolati con antifor- 

 mina al 45-50 °/o. Allestiti i preparati, li coloravo col metodo di Ziehl-Neelsen. 



