Beiträge zur Kenntnis der Spermatogenese beim Regenwurm. 637 



Wie Calkins (1895), so konservierte auch ich zunächst die 

 ganzen Geschlechtssegmente und dann die ganzen herauspräparierten 

 Samenblasen, es erwies sich aber bald als günstiger die in den 

 Samenblasen sehr dicht zusammengedrängten Elemente zu isolieren, 

 und ich erreichte dies dadurch, daß ich die herauspräparierten Samen- 

 blasen in der Konservierungsflüssigkeit zerriß und zerdrückte, so 

 daß die Flocken ihres Inhalts in der Flüssigkeit umherschwammen. 

 Diese Flocken wurden dann weiter behandelt, in der üblichen 

 Weise in Paraffin eingebettet und geschnitten. Ich erhielt so die 

 klarsten und besten Bilder, da nicht nur die Fixierungsagentien die 

 isolierten Elemente ungehindert und schnell beeinflussen konnten, 

 sondern auch die Zellen an den freiliegenden Cytophoren in allen 

 Einzelheiten sehr klar zu erkennen waren. Strichpräparate stellte 

 ich in der üblichen Weise her, indem ich den Inhalt der Samen- 

 blasen und der Eeceptacula seminis mit einem Tropfen physiologischer 

 Kochsalzlösung und mit dem konservierenden Agens auf dem Objekt- 

 träger verrieb und dann die Präparate auf dem Paraffinofen eintrock- 

 nen ließ. Sie dienten mir, mit Eisenhämatoxylin gefärbt, nur vor- 

 übergehend zur Untersuchung der gestreckten Spermatiden und der 

 Spermatozoen , meine endgültigen Eesultate habe ich alle durch 

 Schnittpräparate gefunden. Die Dicke der Schnitte betrug 3 — 4 



Von Konservierungsflüssigkeiten benutzte ich zuerst das Hekmann- 

 sche und das ZENKEßsche Gemisch, auch Sublimat mit Essigsäure 

 und Alkohol, bis ich zur Untersuchung der Mitochondrien die von 

 Benda (1903) angegebene schwach essigsaure Chromosmiumsäure mit 

 Nachbehandlung anwendete. Diese letzte Methode gab mir die besten 

 und zur Untersuchung der Genese des Mittelstücks allein brauch- 

 baren Präparate, so daß meine Zeichnungen fast ausschließlich nach 

 Präparaten angefertigt sind, die nach Bendas Angaben hergestellt 

 worden waren. Nicht nur das Studium der Mitochondrien und der 

 Centraikörner war allein mit Hilfe dieser Methode möglich, sondern 

 das Verfahren stellte auch alle andern Zellteile am besten dar. 



Zur Färbung diente mir während der ersten Hälfte meiner Unter- 

 suchungen ausschließlich das gebräuchliche Eisenhämatoxylin nach 

 Heidenhain, weil es mir aber nicht möglich war mit ihm die Ent- 

 stehung des Mittelstücks zu verfolgen, ging ich zu Gentianaviolett 

 über und endlich zu Bendas Mitochondrienfärbung mit Eisenbeize, 

 sulfalizarinsaurem Natrium und Kristallviolett, mit deren Hilfe es mir 

 in sehr befriedigender Weise gelang, die Centraikörner und die Mito- 

 chondrien und einige Male auch das Sphärenbläschen darzustellen. 



