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Bniììo Aloiìlerosso 



[Memoria XXII. J 



fornita, ove se ne eccettuino i risultati avuti dal prof. A. Russo (1907), dal Regaud e 

 Dubreil (1905), Regaud e Policard (1901). dal Comes (1907) (1). 



L'epitelio della granulosa, come risulta dalle presenti ricerche, ha struttura e funzione 

 d' un organo giandulare, e come tale è un tessuto eminentemente variabile nella forma 

 dei suoi elementi. La mancanza di lìssità nella forma delle cellule secernenti, rende neces- 

 sario non fei^marsi soltanto allo aspetto che esse presentano nelle sezioni di pezzi trattati 

 coi soliti metodi, tanto più che si tratta, nel caso presente, di sezioni d' un tessuto 

 formato da elementi pei- lo più di piccole dimensioni e fortemente stivati fra loro. E 

 perciò che sono licorso al metodo per dissociazione. 



II. Metodi di tecnica. 



Isolavo, appena macellato 1' animale, i follicoli dal connettivo circostante, mediante un 

 taglio di forbici, e nel tempo stesso li introducevo nel liquido fissatore. Per ottenere pre- 

 parati per dissociazione, fra tutte le miscele adoperate, delle quali alcune da me stesso 

 composte, trovai meglio adatta quella consigliata dal Ranvier (1882), e denominata da lui 

 alcool al terso. Feci però una moditìcazione, consistente nel diminuire il quantitativo 

 d'acqua, o usando alcool 40 "/o ovvero 35 °/o e protraendo la macei'azione hno a venti ore, 

 col quale metodo ho ottenuto preparati d'una grande perfezione. Mi servii anche del meto- 

 do adoperato dal Luna (191 1) per lo studio di altri epitelii, consistente in una soluzione 1 % 

 di OsOi fatta agire a lungo; di quello indicato dal Loginoff (191 1), che immei'ge il pezzo 

 in formalina e poi in alcool. Però con quest'ultimo trattamento le cellule dell' epitelio follico- 

 lare appariscono piuttosto opache, e i nuclei poco ben distinti. Il metodo dello Schaeppi (1907) 

 m' è stato utile per mettei'e in evidenza i granuli cellulari osmioi iduttori. Tali metodi, se 

 valgono per gl'inclusi citoplasmici, fissano male generalmente, la cellula. Ond' è che per 

 conservarne bene la forma e mettere in evidenza i corpuscoli lipoidi, adoperai il seguente 

 trattamento: Macerazione in alcool 36 per 20-60 ore; immersione in OSO4 a 0, Ó6 °/o, 

 2-5 ore; lavaggio prolungato in H-jO; dissociazione del pezzo in glicerina pi'eviamente me- 

 scolata con qualche goccia di Verde di Metile o di Ematossilina Ehriich. 



Dopo macerazione con alcool 35o, il colore che dà al preparato la maggior nitidezza 

 ed eleganza è la Saffranina Pfitzner. L'osservazione va fatta in acqua, mai in glicerina. 



Dirò infine d'avere avuto prepai'azioni nitidissime e rapide col seguente procedimento: 

 macerazione in alcool 30 '^/o per 2-4 (ire; colorazione nella miscela seguente: soluzione 

 fisiologica Na CI 0, 75 Saffranina semi-alcoolica. Glicerina neuti'a purissima. 



Per avere dei termini di confronto e potere studiare i rapporti che hanno tu situ le 

 cellule della granulosa, mi sono avvalso di prepai'ati ottenuti coi soliti metodi di fissazione 

 (liquido Zenkei', Benda, Flemming, Mueller, Hermann, Sublimato) e con colorazioni diver- 

 sissime. F'ra tali procedimenti però ho sempre trovato più eleganti i preparati di pezzi fis- 

 sati col liquido Benda, colorati con Saffranina per 24 ore e differenziati in alcool de- 

 bole acidulato. 



(1) C. Giaccio (1910) infatti cosi dice: « In generale si ammette clie dei materiali nutritizi passino 

 dalle cellule follicolari alla cellula-ovo. Però non bisogna tacere che le ricerche speciali, istituite a questo 

 scopo, non sono esaurienti ». 



