2 Dott. Giuseppe Russo [Memoria I. 



l'idrolisi del dipeptide rf-/-leucil-glicina. Così ritornava di nuovo il dibattito: esistono o 

 non esistono protessi nei Molluschi Gasteropodi ? 



Veramente e' è un argomento che ci porta indirettamente ad ammettere 1' esistenza 

 degli enzimi proteolitici in questi animali ed è che durante la digestione la clorofilla delle 

 piante ingerite vien messa in libertà in t'orma di finissimi granuli (Bottazzi) (1) ciò che 

 non si può spiegare se non ammettendo un enzima proteolitico il quale disgreghi i corpi 

 cellulari e i cloioplasti. Enriques (2) ha potuto anche costatare l'assorbimento di granuli 

 liberi di clorofilla da parte del fegato ; perciò ha pensato che questo organo secerni una 

 proteasi nel momento in cui la digestione degli idrati di carbonio comincia. 



Con l'intento di risolvere tale questione, come si vede, così dibattuta e controversa, 

 ho intrapreso le presenti ricerche, servendomi come materiale da studio di grosse Aplisie 

 della baia dell'Isola dei Ciclopi nei dintorni del villaggio di Aci Trezza. 



Tecnica 



Per la ricerca del potere proteolitico ho seguito il criterio chimico che si è rivelato 

 il più esatto , mentre i criterii fisici (dissoluzione dell' albumina cotta , della fibrina , del 

 coagulo di caseina) sono stati dimostrati insufficienti (Lombroso) (3) potendo una sostanza 

 rimanere inalterata nell' aspetto fisico, pur subendo un certo grado di proteolisi. Allo stesso 

 criterio sono ricorso pei la misura della proteolisi e pei' la differenziazione della proteasi. 



A tale intento si determinano nel liquido di digestione , I' azoto totale col metodo di 

 Kjeldhal, 1' azoto totale non proteico, dopo precipitazione delle proteine con 1' acido triclorc- 

 acetico, l'azoto amminico e ammoniacale col metodo al formolo di Sòrensen. Dopo un 

 certo tempo di permanenza in termostato si ripetono le stesse determinazioni (salvo quella 

 dell'azoto totale che è inutile) e si notano le differenze rispetto ai risultati precedenti. Con 

 questo procedimento si conoscono tutti gli elementi più interessanti del processo proteo- 

 litico: l'azoto totale, l'azoto totale non proteico, l'azoto proteico (uguale alla differenza 

 di questi due) l'azoto amminico, l'azoto peptidico (sensibilmente uguale alla differenza fra 

 l'azoto non proteico e l'azoto ti tota bile al formolo). Con ricerche analitiche di questo ge- 

 nere si possono rigorosamente seguire le diverse fasi della digestione, riconoscere la na- 

 tura dei corpi risultanti dall' idrolizzazione della molecola proteica, stabilire fino a qual 

 punto questa si spinge per azione degli enzimi studiati. Dai risultati di questo metodo di 

 ricerca è anche possibile conchiudere con esattezza se , di fronte ad una scissione idroli- 

 tica delle proteine impiegate , il fermento che ha prodotto la trasformazione sia da ascri- 

 vere alle pepsinasi ovvero alle triptasi , sapendosi che solo queste ultime accanto ai pep- 

 toni producono, per ulteriore scomposizione parziale di questi, anche degli amido-acidi. 

 Per la ricerca delle peptasi, più che dei vecchi saggi qualitativi, imperfetti e spesso fallaci 

 mi sono giovato dell'azione di tali fermenti sui polipeptidi sintetici e per la determinazione 

 quantitativa del potere peptolitico ho titolato al formolo i gruppi amminici liberi, prima e 

 dopo l'azione del fermento sul polipeptide impiegato: il valore trovato, paragonato col 

 valore calcolato per l'idrolisi totale del polipeptide, dà la misura esatta del processo. 



(1) Archiv. italienn. d. Biolog. 1901, voi. 35, p. 322. 



(2) Mitt. Zool. Stat. Neapel. t. 15, 1901, p. 374- 



(3) Archiv. d. Fisiolog-, 1912, Voi. 10. 



