Doti. Giusppe Russo 



[Memoria II l 



10 stesso tempo. Ebbene, fatte queste determinazioni, si osserva che nel tubo contenente 



11 peptide -f- 1' estratto enzimatico, non solo è stato scisso intieramente il peptide, ma sono 

 avvenute altre scomposizioni , perchè 1' analisi svela una percentuale di azoto amminico 

 libero assai superiore a quella prevedibile per la semplice scissione del peptide stesso, 

 ciò che risulta dal paragone col controllo contenente il solo estratto. 



La deduzione che si deve trarre è che la scissione fermentativa del substrato aggiunto 

 ha creato anche condizioni più favorevoli all' idiolizzazione dei polipeptidi dell'estratto, acce- 

 lerando così una reazione che dianzi si svolgeva lentamente, sì da determinare l'eccesso 

 di gruppi amminici liberi succennato. Per ottenere questo risultato occorre : 1 . Che l'estratto 

 dell'organo contenente il fermento sia abbastanza concentrato in modo da contenere una 

 certa proporzione di proteine e loro derivati idrolitici. 2. Che il polipeptide sia aggiunto in 

 tenue proporzioni cioè di pochi milligrammi. Il metodo più adatto mi è parso il seguente : 

 tre tubi da saggio si riempiono : uno con ce. 10 di soluzione del peptide, uno con ce. 2 

 di estratto -{- ce. 10 di soluzione del peptide e uno con ce. 2 di estratto -j- ce. 10 di 

 acqua distillata : dopo una permanenza in termostato di una certa durata, si dosa al for- 

 molo, secondo il metodo di Sorensen , l'azoto amminico libero nei tre tubi e si scrivono 

 i risultati. Il tubo contenente lo estratto -j- il polipeptide ci dirà il valore globale della 

 peptolisi , paragonandolo con i controlli contenenti uno il solo estratto, 1' altro il solo po- 

 lipeptide. 



Per calcolare l' azoto amminico libero del polipeptide allo stato d' idrolisi completa, 

 cioè quando è completamente scisso nei suoi amido-acidi, basta seguire il criterio teorico 

 di raddoppiare, triplicare, quadruplicare ecc., il valore iniziale del suo azoto amminico , a 

 seconda che si tratti di un di, tri, tetra-peptide. In tal guisa, se, dopo 1' azione enzimatica, 

 si troverà per 1' azoto amminico una cifra che superi 1' aumento dovuto all'idrolisi del 

 substrato aggiunto, concluderemo che l'eccesso dei gruppi amminici è da attribuirsi ad idro- 

 lisi dell' estratto. 



Ed ora trascrivo dal protocollo le principali esperienze eseguite con tal metodo : 



Asioìie dell' estratto acquoso di fegato di Sepia sulla sol. di Di^licil glicina — — 



160 



24 ore in termostato a 37° 



N 



Quantità adoperata di NaOH — 



1 o 



in cmc. 



Azoto 

 amminico libe- 

 ro in mmgr. 



N 



Diglicil-glicina 



160 





cmc. 



I O 



o. 75 



1,05 



N 



Diglicil-glicina 



160 





» 



IO 







+ estratto acquoso 



di fegato .... 



» 



2 



I 5. 50 



21, 70 



Acqua distillata 







IO 







+ estratto acquoso 



di fegato .... 



» 



2 



2. 90 



4, OÓ 



N 



Diglicil-glicina 



160 





cmc 



I O 







dopo 1 



' idrolisi totale (calcolato) 







2. 25 



3. 15 



