Doli. Giuseppe Russo 



[Memoria IV-'l 



Abderhalden (9), Abderhalden e Heise (10), Sellier (11), in brevi lavori, ne costatano som- 

 mariamente la presenza quantunque con una tècnica imperfetta , ed insufficiente. Infatti 

 assai di raro le ricerche di questi Autori sono state scortate da criterii rigorosi quantita- 

 tivi, adoperando i polipeptidi come sostrato dell'azione enzimatica. I loro metodi sono pri- 

 mitivi ed inadatti a fornirci nozioni precise sul decorso e le modalità del processo pepto- 

 litico. Così Abderhalden si è servito del peptone di seta che ha sottoposto in vitro all'azione 

 degli organi : dalla deposizione di cristalli di tirosina concludeva per l'avvenuta peptolisi. 



Altri , come il Sellier , hanno utilizzato per lo stesso scopo , il dosaggio dei gruppi 

 amminici liberi prima e dopo 1' azione fermentativa sul peptone , la comparsa del tripto- 

 fano, rivelato dalla nota reazione con l'acqua bromata o della tirosina svelata dalla tirosi- 

 nasi, la scomparsa della reazione del biureto ecc., affermando 1' esistenza di un fermento 

 peptolitico ogni qualvolta da uno o da parecchie di questi criterii si potesse desumere il 

 distacco di ammido-acidi resi liberi in seguito al frazionamento di complessi peptidici. 



Ora tali metodi sono da ritenersi imperfetti, come dichiarano gli stessi Autori che 

 se ne sono serviti e non hanno che un valore semplicemente qualitativo. Infatti la com- 

 parsa di certi ammido-acidi liberi come la tirosina o il triptofano non può costituire un 

 indice sicuro dell'esistenza di peptasi perchè si sa che il processo triptico, per sè solo, 

 conduce ad una parziale idrolisi del peptone; la scomparsa della reazione del biureto, se 

 è una preziosa caratteristica della scissione dei peptoni e polipeptidi , non dimostra però 

 che tale scissione è spinta fino agli ammido-acidi perchè molti polipeptidi non rispondono 

 al biureto ; infine la soluzione albuminosa del fermento può per sè sola dare la reazione 

 del biureto o liberare del triptofano. 



Pertanto il metodo più esatto e razionale di sottoporre cioè in vitro i polipeptidi sinte- 

 tici all' azione dei liquidi contenenti i fermenti è stato assai poco adoperato negl' Inverte- 

 brati : Abderhalden (7) lo ha usato solo in tre esperienze servendosi della glicil-tirosina, 

 Clementi (8) una volta, servendosi della leucil-glicina. 



Come si rileva da questi pochi cenni adunque, negl'Invertebrati , le notizie sugli en- 

 zimi peptidolitici sono assai scarse e superficiali, mancando in molti casi qualunque con- 

 tributo sperimentale, in molti altri essendovi dubbi ed incertezze sulla loro stessa esistenza 

 e sconoscendosi, quasi in ogni caso, completamente il loro modo di agire ed il loro com- 

 portamento biochimico in rapporto alla scissione dei polipeptidi. Conscio dell' insufficienza 

 del proprio contributo , lo stesso Sellier dichiara di non aver potuto spingere troppo in- 

 nanzi le sue ricerche sulle peptasi degl'Invertebrati per mancanza dei polipeptidi sintetici. 

 Anche la Neppi (12) nel suo recente libro sui fermenti, afferma essere questo un campo 

 quasi inesplorato ed ancora intieramente aperto all' indagine degli studiosi. 



A colmare questa lacuna ho intrapreso il presente studio, incoraggiato da una parte 

 dal ricco materiale offertomi dalla Stazione Marittima di Biologia dell' Isola dei Ciclopi, 

 dall' altra da una sufficiente scorta di polipeptidi che mi permettevano un contributo affatto 

 nuovo in questo importante capitolo degli enzimi. 



Tecnica e Metodo 



Per la determinazione quantitativa della peptolisi e per seguirne le modalità, mi sono 

 valso di vari polipeptidi che ho sottoposto, previa aggiunta di toluolo, all' azione dei suc- 

 chi digestivi o degli estratti acquosi degli organi. Il risultato finale è stato stabilito tito- 



