Sugli enzimi peptidol itici degl' Invertebrati e sulla loro ecc. 



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landò al formolo, secondo il metodo di Sorensen, i gruppi amminici liberi prima e dopo 

 1' azione del liquido fermentativo. Il Sorensen (13) medesimo adoperò il suo metodo per 

 lo studio della scissione di miscele di polipeptidi a costituzione chimica poco definita ed 

 anche il Sellier (11) si giovò di questo metodo per seguire la scissione idrolitica del pep- 

 tone sotto l'influenza delle peptasi. Ma il Clementi (14) per il primo lo applicò allo studio 

 dell' idrolist di singoli peptidi a costituzione chimica definita , rilevandone i vantaggi pra- 

 tici. In quest' ultimo caso è facile stabilire quantitativamente il valore della peptolisi. In- 

 fatti essendo il peptide noto chimicamente ed essendone nota la quantità impiegata per 

 ogni saggio, può calcolarsi quale deve essere teoricamente il valore dei gruppi amminici 

 liberi nel caso che tutto, il peptide venga scisso dal fermento. A seconda che si tratti di 

 un dipeptide, tripeptide, tetrapeptide ecc., in seguito all'idrolisi completa, si dovrà trovare 

 per l'azoto amminico libero una cifra doppia, tripla, quadrupla ecc. rispetto a quella ini- 

 ziale , per la trasformazione di tutti i gruppi immillici in gruppi ammidici Se non si 

 tratta di una scissione completa del peptide si può esattamente stabilire la quantità che è 

 stata scissa , riferendosi sempre al valore teorico dell' idrolisi totale e paragonandolo col 

 valore trovato in ogni singolo caso. Questo metodo, io credo, offra dei vantaggi sui tanti 

 altri che sono stati proposti , i quali in generale o richiedono grandi quantità del peptide 

 o esigono 1' uso dei peptidi otticamente attivi o delle operazioni in ogni caso più com- 

 plicate. 



Ecco intanto la descrizione del nostro procedimento tecnico in ogni esperienza : Si 

 collocano in termostato tre provette debitamente sterilizzate delle quali una contiene ce. 2 

 del liquido fermentativo addizionato con ce. 10 di acqua distillata, una ce. 10 della so- 

 luzione titolata del peptide, ed una infine contenente ce. 10 della soluzione del peptide 

 con ce. 2 del liquido fermentativo. Dopo una permanenza in termostato di una certa du- 

 rata, si titolano al formolo i contenuti delle tre provette. Confrontando il valore dell'azoto 

 amminico della soluzione del peptide solo, con quello dilla soluzione del peptide su cui 

 ha agito il fermento si ha un' esatta misura del processo peptolitico. 



In ogni tavola riassuntiva , ho riportato i dati delle esperienze in base al procedi- 

 mento surriferito e, per essere più chiaro, ho segnato la cifra dell'azoto amminico libero 

 della sola soluzione del peptide prima e dopo 1' azione del fermento , sottraendo in tal 

 caso 1' azoto amminico libero trovato nel controllo contenente la sola soluzione del fer- 

 mento dopo un'uguale permanenza in termostato. Ho segnato anche la cifra dell' azoto am- 

 minico per il caso dell' idrolisi totale del peptide calcolata con i criteri teorici succennati. 

 Infine è riportata anche in mmgr. la quantità del peptide idrolizzata in ogni esperienza. 



Esperienze. 

 Molluschi Cefalopodi 



Varii Autori si sono occupati delle proprietà enzimatiche degli estratti epatici o del 

 secreto digestivo puro ottenuto col sondaggio di uno dei condotti secretori dell' organo 

 epatico. La presenza di un fermento proteolitieo è certa Krukemberg ( 15) , Griffìths (16), 



(i) In questo ragionamento bisogna tenere presente che i gruppi ammidici liberi non sono più titol abili 

 al formolo quando fan parte di certi speciali aggruppamenti come quelli dell' urea e della -guanidina : così la 

 arginina, un diamidoacido che possiede l'aggruppamento guanidinico , si comporta al formolo come un acido 

 monobasico, appunto perchè I' ammidogeno dell' aggruppamento guanidinico sfugge all' azione del formolo. 



