APPENDICE 



NOTE I 



Milieux de culture, leur concentration. 



Pour préparer les tubes de culture, je me suis presque exclusivement 

 servi de décoctions de salep. L'emploi du salep comme matière nutri- 

 tive était tout indiqué, ce produit étant obtenu par la pulvérisation de 

 bulbes d'Ophrydées desséchés. Le salep pulvérisé est vendu commu- 

 nément par les pharmaciens; d'après les échantillons divers que j'ai 

 examinés, c'est un produit assez variable. Celui que j'ai employé avait 

 toujours la même origine. 



Voici la méthode suivie pour préparer une décoction claire de salep. 

 On dilue 00 grammes de salep dans deux litres d'eau (1), de façon à 

 éviter la production de grumeaux ; on laisse macérer à froid pendant 

 vingt-quatre heures, puis on chauffe pendant une heure dans l'autoclave 

 à 120°. Au sortir de l'autoclave on a soin d'ajouter un poids d'eau tiède 

 égal au poids d'eau évaporée, qu'il est facile d'apprécier en pesant le 

 ballon chauffé avant et après son passage à l'autoclave. La décoction 

 encore tiède est mise dans un vase à décantation; on en sépare le 

 lendemain la partie supérieure, qui doit être limpide, de consistance 

 un peu sirupeuse et d'une couleur ambrée. Cette décoction limpide 

 à 30 p. 1000 ne peut être conservée qu'après une nouvelle stérilisation. 

 Au moment de l'emploi pour la préparation d'un milieu de culture, 

 on la dilue, de la manière voulue, par adjonction d'eau. 



L'appréciation du degré de concentration des décoctions employées 

 pour les cultures a une assez grande importance, comme on l'a vu dans 

 le chapitre VI. J'ai cherché à apprécier la valeur absolue de cette 

 concontration en déterminant la température de congélation des solutions 

 nutritives employées, par les moyens usuels de la cryoscopie. Dans le 

 cours de ce mémoire, la concentration de chaque solution est toujours 

 exprimée par le nombre qui mesure, en centièmes de degré centigrade, 

 l'abaissement au-dessous de zéro de la température de congélation. Il 

 serait facile, au moyen d'une formule connue, de déduire de chaque 

 nombre ainsi donné la pression osmotique de la solution correspon- 

 dante. 



Je n'ai pas répété les mesures cryoscopiques pour chaque solution 

 que je préparais, mais j'ai, une fois pour toutes, mesuré les tempé- 



(1) Cette proportion de 30 p. 1000 est la plus convenable. Exceptionnelle- 

 ment j'ai préparé une décoction à 40 p. 1000, mais c'est à peu près la limite 

 extrême possible ; les décoctions plus riches en salep sont très visqueuses -et 

 se décantent mal. 



