APPENDICE 



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chon de coton qui ferme les tubes moisisse et que des Mucédinées 

 diverses arrivent ainsi à pousser dans l'intérieur du tube et l'en- 

 vahissent. 



Tous mes tubes étaient stérilisés au four à flamber d'abord, avant 

 l'introduction du milieu de culture, à l'autoclave ensuite. Malgré cela, 

 ils moisissaient assez régulièrement au bout de quelques mois, dans 

 mes premières expériences. L'emploi de petits capuchons de caout^ 

 chouc recouvrant l'ouverture des tubes et le coton ne remédiait pas à 

 cet état de choses, bien au contraire. Les petits capuchons en papier 

 d'étain valent mieux, mais guère. A la fin, j'ai eu recours, pour boucher 

 mes tubes de culture, à du coton imprégné d'azotate d'argent et je m'en 

 suis bien trouvé, mes cultures ayant pu souvent dès lors subsister un 

 an et plus sans se contaminer. 



On prépare au moment de l'emploi une solution alcoolique d'azotate 

 d'argent, en mêlant 25 centimètres cubes d'une solution aqueuse à 

 10 p. 100 de ce sel avec 475 centimètres cubes d'alcool à 95°. On se sert 

 de cette solution pour imbiber uniformément 100 grammes de coton. 

 Le coton est ensuite mis à sécher à l'obscurité. Quand il est sec, on s'en 

 sert pour boucher des tubes qu'on stérilise au four à flamber et qu'on 

 garde dans un placard sec. Le chauffage fait prendre au coton une 

 couleur brun violacé. Les tubes de culture qui doivent servir au semis 

 des graines ont d'abord été bouchés au coton ordinaire et stérilisés. 

 Au moment de les employer on remplace le bouchon de coton de 

 chacun d'eux par un bouchon de coton à l'azotate d'argent pris sur 

 l'un des tubes préparés comme je viens de dire. Ces bouchons de 

 coton doivent être assez serrés. Souvent j'ai recouvert l'ouverture de 

 chaque tube avec un petit capuchon en papier d'étain, mais c'est, je 

 pense, une précaution qui n'a pas d'importance essentielle. 



Dans la plupart de mes expériences je me proposais de comparer les 

 semis faits dans divers tubes de culture- Pour que la comparaison soit 

 valable, il faut avoir soin de semer les graines et aussi les champignons 

 au même niveau dans tous les tubes; ainsi, les graines sont atteintes 

 par les champignons à peu près en même temps dans les divers tubes 

 et elles subissent d'une manière comparable les effets de la dessiccation 

 des milieux de culture au cours de l'expérience. 



NOTE III 



Méthodes pour l'isolement dés champignons endophyTes. 



La méthode la plus sûre pour cultiver un champignon endophyte 

 consiste à isoler de L'intérieur d'une cellule un peloton de mycélium 

 bien vivant et à le semer dans un tube de culture sur un milieu stérilisé 

 et convenable. J'ai dû appliquer constamment cette méthode pour 

 les expériences, décrites dans le chapitre III, qui démontrent l'exal- 

 tation d'activité des endophytes par la vie dans les plantules. Il s'agissait 



