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JOURNAL DE MICROGRAPHIE. 



Procédé technique pour ï'étude des embryons de Poissons. (1) 



Les œufs de Salmonidés sont généralement employés par les embryologistes 

 pour l'étude du développement des Poissons osseux. Il est difficile de les observer 

 à l'état frais, soit en entier, par transparence, à cause de leur épaisseur d'enve- 

 loppe, soit après les avoir ouverts, par suite du peu de consistance du germe, 

 surtout au début de la segmentation. L'acide chromique, réactif le plus fréquem- 

 ment employé pour durcir ces œufs, altère facilement les jeunes cellules et 

 déforme les embryons en les comprimant entre la coque inextensible de l'œuf et 

 la masse vitelline soliditiée. J'emploie depuis bientôt deux ans, dans le labora- 

 toire d'Embryogénie comparée du Collège de France, un procédé qui permet d'ex- 

 traire des œufs de Truite et de Saumon les germes et les embryons, avec la plus 

 grande facilité et sans leur faire subir la moindre altération. 



Je place l'œuf pendant quelques minutes dans une solution d'acide osmique au 

 centième, jusqu'à ce qu'il ait acquis une couleur brun-clair, puis dans un petit 

 vase renfermant de la liqueur de Millier, et je l'ouvre au milieu de ce liquide avec 

 une paire de ciseaux fins. La masse vitelline centrale qui se coagule immédiate- 

 ment au contact de l'eau, se dissout, au contraire, dans la liqueur de Mûller, 

 tandis que le germe et la couche corticale solidifiés peuvent être extraits de l'œuf, 

 et examinés sur une lame de verre. 



En traitant le germe par une solution de vert de mélhyle, puis par la glycé- 

 rine, j'ai pu observer dans les cellules de segmentation les phénomènes très- 

 délicats signalés dernièrement par Auerbach, BiUschli, Strasburger, Hcrtwig, etc., 

 et qui accompagnent la division du noyau, à savoir : la disposition rayounée du 

 protoplasma aux deux pôles de la cellule, la plaque nucléaire, les faisceaux de 

 filaments qui en partent et les autres phases suivantes. 



Ce fait prouve que le traitement subi par i'œuf n'altère en rien les éléments du 

 germe. 



Pour pratiquer des coupes à travers des germes' ou des embryons ainsi extraits 

 de l'œuf, je les laisse pendant quelques jours dans la liqueur de Mûller, et je les 

 colore par le picrocarminate d'ammoniaque. Après les avoir déshydratés en les 

 traitant par l'alcool à 40°, puis par l'alcool absolu, je les mets pendant 24 heures 

 dans le collodion. L'embryon est ensuite orienté sur une petite lame de moelle de 

 sureau imbibée d'alcool et recouvert d'une couche de collodion. Lorsque le coi- 

 lodion a acquis une consistance suffisante, on peut faire des coupes très-nnnees 

 comprenant à la fois l'embryon et la lamelle du sureau, et on les conserve dans la 

 glycérine. 



Ce procédé est applicable à toute espèce d'embryon peu épais, permettant la 

 coloration en masse. Il a l'immense avantage de permettre de voir à quel niveau 

 de l'embryon chaque coupe est pratiquée, de conserver celle-ci au milieu d'une 

 masse transparente qui maintient toutes les parties et les empêche de se briser, 

 comme il arrive très-souvent lorsqu'on emploie une masse à inclusion dont il faut 

 débarrasser la coupe avant de la monter. 



Dans son Précis de technique microscopique, M. Mathias Duval avait déjà recom- 

 mandé le collodion pour les recherches embryologiques, mais sans indiquer son 

 mode d'emploi. Nous espérons rendre service aux cmbryologisies en leur faisant 

 connaître un procédé qui pourra leur être de quelque utilité. 



F. Hennisguy, 



Préparateur du cours d'embryogénie comparée au Collège de France. 

 (I) Note lue à la Société Pkilomathique de Paris, le 22 no ombre 1878. 



