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J'ai déjà expliqué à peu près complètement comment se fait le passage des 

 réactifs fixatifs dans les colorants. Voici un tableau synoptique des différentes 



façons de procéder : 



A. Au sortir de l'alcool, du moins d'un alcool faible, l'objet peut se colorer de 



suite au carmin au borax alcoolisé; mais il doit être lavé dans l'eau si on 

 veut le transporter dans le carmin à l'alun, l'hématoxyline ou le picrocar- 

 minate d'ammoniaque. 



B. Après l'emploi de l'acide picrique ou de la liqueur de Kleinenberg, il faut 



procéder à un lavage prolongé dans l'alcool à 70, puis la préparation se 

 trouve ramenée au même point que dans le paragraphe A. 



C. Après l'emploi de l'acide osmique, il faut dans tous les cas laver l'objet dans 



l'eau, mais on peut le transporter bientôt dans le picrocarminate d'ammo- 

 niaque ou le carmin à l'alun, tandis qu'il faut le laisser séjourner longtemps 

 dans l'eau (en moyenne 48 heures) avant de le faire passer dans l'alcool 

 et le carmin au borax alcoolisé. 



D. Après l'emploi du bichlorure de mercure ou des liqueurs qui en dérivent, le 



passage dans l'alcool et dans tous les colorants peut se faire de suite, et 

 les colorations se font très bien. 



E. Après l'emploi de l'acide chromique, il faut laver longuement dans l'eau, 



puis transporter dans l'alcool ou les colorants. 



2° Coloration des tissus. 



Je n'indiquerai que les réactifs les plus usités, lesquels suffiront assez longtemps 

 au débutant. La plupart se font à l'aide du carmin, et il faut d'abord bien com- 

 prendre quelle est l'action de ce réactif. 



Le carmin se fixe sur le protoplasme et s'accumule par suite davantage, en 

 produisant une coloration rouge plus intense, dans les régions où ce dernier est 

 le plus condensé. Or, le point de plus grande concentration du protoplasme dans 

 une cellule, c'est son noyau ; aussi ce dernier se montre-t-il comme un point 

 rouge vif dans un milieu plus pâle. Toute la cellule néanmoins est légèrement 

 teintée, tandis que des tissus amorphes, tels qu'un cartilage, ou la cuticule des 

 arthropodes, ou la substance gélatineuse de l'ombrelle des méduses, ou les enve- 

 loppes de beaucoup de cellules, restent complètement incolores. Dès lors, l'on 

 peut distinguer les cellules, leurs noyaux, les tissus cellulaires et les tissus 

 amorphes, et l'on obtient une coloration dite élective, parce qu'elle choisit 

 certains éléments pour s'y fixer. Nous verrons plus loin qu'en plongeant l'objet 

 dans un réactif (éclaircissant), qui rend complètement diaphanes les régions où 

 le carmin ne s'est pas reposé, on aperçoit encore bien plus nettement les points 

 colorés. Un petit animal, une larve d'annélide par exemple, ainsi traitée et 

 montée en préparation dans le baume, laisse voir facilement au microscope, à un 

 grossissement faible, les régions où sont accumulées les cellules. L'intestin, par 

 exemple, est nettement limité par la zone des cellules épithéliales. L'ensemble 

 des organes se distingue clairement, mais pour étudier les détails de leur consti- 

 tution histologique, il faudrait recourir aux coupes fines qui ne détachent qu'une 

 seule épaisseur de cellules et permettent ainsi de les étudier dans tous leurs 

 détails. 



Le carmin et la cochenille à l'alun sont les colorants dont la préparation est la 

 plus facile et l'emploi le plus simple. 



Carmin à l'alun. — ^Yoici comment on prépare le carmin : 

 On verse dans une capsule de porcelaine cent centimètres cubes d'eau, cinq 

 grammes d'alun et un gramme de carmin. On recouvre la capsule à l'aide d'un 

 di.sque de verre pour empêcher l'évaporation, puis à l'aide d'une lampe à alcool, 

 on fait bouillir pendant quinze à vingt minutes. On soulève de temps en temps 



