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Parte sperimentale. 



Il punto fondamentale per la soluzione del problema della trasformazione 

 del metodo di Sorensen in micrometodo consiste nel dimostrare che i risultati, 

 che si ottengono mediante la microtitolazione nell'analisi delle soluzioni di 

 aminoacidi allo stato chimicamente puro, non differiscano molto dai risultati 

 che sono da attendersi in base al calcolo teorico. Il quesito, la cui soluzione 

 apparisce più difficile e a cui mi propongo di rispondere con altre ricerche, 

 è quello riguardante l'applicazione della microtitolazione al formolo, quando 

 nei liquidi da esaminare sono presenti sostanze le quali turbano l'esattezza 

 dei risultati, come ad esempio nel caso in cui si voglia eseguire la deter- 

 minazione quantitativa assoluta degli aminoacidi nel sangue. 



Nelle seguenti analisi dirette a dimostrare sperimentalmente la possi- 

 bilità di trasformare in micrometodo il metodo della titolazione al formolo, 

 ho introdotto le seguenti modificazioni alle modalità della tecnica indicate 

 da Sorensen: 



1° uso di una soluzione l/50n di idrato di sodio; 

 2° uso di soluzioni 1/lOOOw di aminoacidi o polipeptidi acqua priva 

 di CO 2 ; 



3° uso di burette da 1 cmc. divise in 200 parti; 



4° per 10 o 20 cmc. di soluzione di aminoacidi, 1 cmc. di miscela 

 di formolo, in cui l'alcalinità è spinta possibilmente fino al rosso evidente 

 (secondo stadio di Sorensen). 



Ho sottoposto all'analisi la glicocolla, la leucina, il dipeptide cJZ-leucil- 

 glicina, e il guanidopolipetide glicociamilglicina. Qui sotto sono riportati per 

 esteso anche i dati ottenuti nelle diverse fasi in un caso di microtitolazione 

 al formolo: 



Indicatore 



Controllo 



Soluzione di glicocolla 

 1/IOOOm 



Fenolftaleina 



1 cent, miscela di formolo 



9 ceni, di acqua distillata 

 priva di CO a . 



9 ccm. di soluzione 



1 ccm. miscela di formolo 



Colore rosso (evidente) . . 

 Colo e rosso intenso . . . 



ceni, di Na OH IjbOn ado- 

 perati nella titolazione 



0,550 

 0,650 

 0.750 



ccm. di NaOH 1/50 «ado- 

 perati nella titolazione 



0,080 

 0,160 

 0,260 



