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è un metodo essenzialmente chimico e ponderale consistente nell'isolamento e 

 nella individualizzazione chimica, mediante la eterificazione, degli aminoacidi, 

 in cui essi vengono o dovrebbero essere scissi per azione dei fermenti. 



Abderhalden e Koerker (') hanno elaborato in seguito un metodo ottico 

 per lo studio dell'azione dei fermenti proteolitici sui polipeptidi, traendo 

 profitto dal fatto osservato prima da Fischer, che molti polipeptidi sono 

 otticamente attivi e posseggono un potere rotatorio più forte dei loro pro- 

 dotti di scissione, donde la possibilità di constatare e seguire mediante deter- 

 minazioni polarimetriche la scissione dei polipeptidi operata dagli enzimi. 



Hans Euler ( 2 ) ha elaborato un metodo elettrometrico per riconoscere 

 e studiare la scissione dei polipeptidi operata dai fermenti. 



I metodi finora in uso non sono dei metodi quantitativi, in senso asso- 

 luto ed io mi sono proposto di colmare tale lacuna. Poiché gli aminoacidi 

 sono legati fra loro nella molecola dei polipeptidi in catena amidica, e poiché 

 la loro scomposizione fermentativa dà luogo essenzialmente alla rigenerazione, 

 da una parte, dei gruppi carbossilici e, dall'altra, dei gruppi amidici degli 

 aminoacidi, secondo lo schema generale seguente: 



R — CO — NH — R -j- H — OH = R — CO — OH -f- NEL — R, 



è evidente che, determinando quantitativamente i gruppi aminici liberi dei 

 polipeptidi prima e dopo l'azione dei fermenti peptolitici, possiamo ricono- 

 scere l'azione da questi esercitata sulla loro molecola. Il metodo che si può 

 adoperare per la determinazione volumetrica dei gruppi aminici liberi è il 

 metodo della titolazione al formolo di Sòrensen. Lo stesso Sòrensen ( 3 ), de- 

 scrivendo il suo metodo, scrisse : «Nello studio della scomposizione di poli- 

 peptidi o di miscele di polipeptidi, per cui manca finora un metodo general- 

 mente praticola titolazione al formolo potrà essere di grande utilità ». Egli 

 stesso, pur avendo adoperato il metodo della titolazione al formolo per lo studio 

 della scissione di miscele di polipeptidi a costituzione chimica poco definita, 

 non lo applicò per lo studio della scomposizione fermentativa dei polipeptidi 

 allo stato chimicamente puro. Ricerche invece sulla determinazione quanti- 

 tativa dei gruppi aminici liberi dei polipeptidi non mancano: Abderhalden 

 e van Slyke ( 4 ), Abderhalden e Haslian ( 5 ) hanno studiato il comportamento 

 di tutta una serie di polipeptidi rispetto al metodo di van Slyke della de- 



( 1 ) Abderhalden und Koerker, Die Verwendung optisch activer Polipeptide sur Prù- 

 fung der Wirksarnkeit proteolitischer Fermente. Zeitschr. f. Physiol. Chemie, LI, 294, 

 an. 1905. 



( 2 ) Hans Euler, Fermentative SpaUung von Dipeptiden. Zeitschr. f. physiol. 

 Chemie LI, an. 1905. 



( 3 ) Sòrensen, Enzimstudien. Biochemische Zeilsckrift, 7, 33, an. 1907. 



(*) Abderhalden und van Slyke, Die Beslimrnung des Arninostickstojfs in einigen 

 Polypeptiden. Zeitschr. f. physiol. Chemie, 74. 



('') Abderhalden und Haslian, Weber die Verwendung der Estermetìiode ziim Nachwcis 

 von Aminosaùren neben Polypeptide. Zeitschr. f. physiol. Chemie, 77. 



