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3° periodo di tre giorni, in cui il cane riceve ogni giorno, col pasto, gr. 3 di 



benzoato sodico e gr. 6 di glicocolla; 

 4 U periodo di due giorni, in cui il cane riceve ogni giorno gr. 3 di benzoato 

 sodico, e gr. 10 circa del composto di glicocolla con formaldeide. 



Debbo qui espressamente notare, che, per prove precedenti, i cani rifiu- 

 tano il cibo mescolato al composto di glicocolla, e che è inutie introdurre 

 loro nello stomaco queste sostanee mediante la sonda, perchè gli animali 

 quasi sempre lo vomitano. Perciò sono dovuto ricorrere all'artifizio già usato 

 da Azzi, quello cioè di introdurre la sostanza, con una siringa Record, in 

 un'ansa intestinale, mediante una piccola ferita laparatomia. Questa piccola 

 operazione, fatta con cautele antisettiche, non altera troppo le condizioni 

 degli animali in esperimento, anche se ripetuta per due giorni di seguito, 

 come io appunto ho fatto. 



Il composto di glicocolla e formaldeide fu così preparato : 



20 gr. di glicocolla sono sciolti in circa 200 gr. di acqua, e ad essi 

 si aggiungono 100 ce. di formalina ridistillata a circa il 40° ' o - Si tiene la 

 miscela a bagnomaria a G0° per 5 giorni. Il liquido diventa giallo scuro, e 

 mostra leggeri riflessi verdastri di fluorescenza. Si toglie tutta la formaldeide 

 mediante una corrente d'aria alla temp. di 60°, fino a scomparsa della rea- 

 zione di Schiff. Si evapora nel vuoto, e si ottengono così circa 30 gr. di una 

 massa resinosa, solubilissima in acqua. 



Per le determinazioni dell'acido ippurico, dopo avere sperimentato altri 

 metodi, fra cui quello di Wiechowski, ho dato la preferenza al metodo più 

 recente del Folin, che così ho eseguito: 



Si acidificano 100 ce. di urina con HC1 e si trattano cinque volte 

 con etere di petrolio in un imbuto a separazione a fine di togliere l'acido 

 benzoico libero e altri acidi, che poi si scioglierebbero nel cloroformio: 

 come è noto l'acido ippurico è insolubile nell'etere di petrolio. 20 ce. del- 

 l'urina così trattata, previa alcalinizzazione con 2 ce. di NaOH 5 %, ven- 

 gono evaporati a bagnomaria fino a secchezza ; in tal modo si scinde l'acido 

 ippurico in acido benzoico e glicocolla. Il residuo, sciolto in 25 ce. di acqua 

 e altrettanti di HN0 3 concentrato, si versa in un pallone Kjeldahl da 

 500 ce, e si fa bollire per quattro ore e mezzo con l'aggiunta di 20 ctgr. 

 di nitrato di Cu. Dopo raffreddamento, si versa in un imbuto a separazione 

 da 500 ce, si aggiunge alla soluzione una quantità di solfato di ammonio 

 sufficiente per saturarla (circa 55 gr.) e si estrae con cloroformio, adoperando 

 50, 35, 25, 25 ce. di questo. Il cloroformio, raccolto in un altro imbuto a 

 separazione da 500 ce, viene agitato con 100 ce di una soluzione satura di 

 NaCl, che contiene per ogni litro ce 0,5 di HC1 concentrato. L'acido ben- 

 zoico, che è contenuto nel cloroformio così trattato, è versato in un Erlen- 



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meyer da 500 ce e viene dosato mediante una soluzione — di etilato 



