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LE NATURALISTE 



rantes, variables d'ailleurs en nombre, dans une môme 

 espèce. Le protoplasma lui-même se divise en deux 

 couches, l'une dite sous-cuticulaire, d'apparence réticulée 

 ou formée d'alvéoles en forme de tonnelet; l'autre, dite 

 corps central, se colorant fortement par certains réactifs 

 et formée parfois d'une ou plusieurs files d'alvéoles. 



Dans sa masse, le protoplasma présente souvent des 

 espaces clairs, des vacuoles, tantôt disséminés dans toute 

 sa longueur, tantôt groupés au centre ou à une extré- 

 mité. 



Quant au noyau, qui ne manque jamais dans les cel- 

 lules animales ou végétales (sauf les algues de la famille 

 des Chlorophycées), on n'en trouve, ici, pas trace, et 

 c'est un caractère à la fois très général et très singulier 

 des Bactéries. Certains naturalistes considèrent cepen- 

 dant que le noyau existe dans les éléments microbiens, 

 mais diminué dans le protoplasma et constituant soit une 

 bonne partie du « corps central », soit les granulations 

 avides de réactifs colorants que nous avons signalés plus 

 haut; mais ce n'est là qu'une vue de l'esprit. 



Dans le protoplasma, ' on peut mieux trouver diverses 

 substances issues de leur activité, notamment des 

 « graines rouges », des granulations graisseuses qui lui 

 donnent une apparence grisâtre, des granulations de 

 soufre chez les espèces vivant dans des eaux sulfureuses 

 et de nombreuses matières colorantes chez les bactéries 

 « chromogènes ». 



Nous venons, dans ce qui précède, de parler, à plu- 

 sieurs reprises, de « réactifs colorants » ; il peut être 

 utile de donner quelques notions sommaires sur la ma- 

 nière dont on les utilise. 



Les matières colorantes dont on se sert pour colorer 

 les microbes se divisent, au point de vue de leur action, 

 en deux groupes : 



1° Les couleurs acides (éosine, tropéoline, fluorescéine, 

 safranine, acide picrique), qui teignent les microbes à 

 peu près uniforméiTient, de même que les tissus qui les 

 environnent ; 



2° Les couleurs basiques (couleurs d'aniline), qui co- 

 lorent plus les microbes que les tissus environnants, ce 

 qui les fait apparaître plus nettement. 



Certaines couleurs agissent mieux quand on y ajoute 

 un « mordant », comme la potasse étendue, le borate de 

 soude, l'aniline, le phénol, le thymol, etc. 



Parmi les matières colorantes les plus employées, ci- 

 tons la fuchsine, le violet de gentiane, le violet dahlia, 

 le bleu de méthylène, le vert de méthyle, l'hématoxyline. 



Voici comment on procède pour effectuer ces colora- 

 tions ; sur une lamelle mince tenue horizontale à l'aide 

 d'une pince, on dépose une goutte du liquide contenant 

 les microbes et on l'étalé le plus possible à l'aide de l'ai- 

 guille de platine. Rapprochant alors la lamelle d'une 

 flamme, on attend que la surface de la lamelle soit des- 

 séchée. A ce moment, on fixe les éléments, c'est-à-dire 

 que l'on coagule leur protoplasma, en passant la lamelle 

 deux ou trois fois dans la flamme, mais, naturellement, 

 sans que la température fasse rôtir les microbes qui sont 

 à sa surface. Dans l'opération précédente, la surface mi- 

 crobienne doit être toujours maintenue en haut pour évi- 

 ter l'attouchement direct de la flamme. Après fixation, 

 on dépose sur la lamelle une goutte de matière colorante 

 et on la laisse agir plus ou moins longtemps, suivant les 

 cas. Quand on juge la coloration achevée, on lave à l'eau 

 distillée, on laisse sécher, on traite par le xylol. Finale- 

 ment, on applique la lamelle, retournée cette fois, sur 



une lame de verre, en les séparant par une goutte de 

 baume de Canada. 



Pour obtenir certains détails de structure, il est sou- 

 vent avantageux de colorer d'abord fortement, puis de 

 décolorer ensuite. On peut ainsi différencier des espèces : 

 les unes se décolorent facilement, les autres difficile- 

 ment. Le procédé de décoloration le plus employé est 

 bien connu des bactériologistes sous le nom de méthode 

 de Gram. Les microbes, fixés par un mélange d'alcool et 

 d'éther, sont coloriés à la solution de thionine phéni- 

 quée, puis, sans être lavés, soumis à la solution de 

 Gram : 



Iode 1 gramme 



lodure de potassium 2 — 



Eau distillée 200 — 



On laisse dans cette solution de quatre à six secondes, 

 puis on décolore par un mélange d'alcool absolu et d'un 

 tiers d'acétone. Les bactéries qui « prennent le Gram » 

 se distinguent très bien de celles qui ne le « prennent 

 pas ». 



Bien entendu, les modes de coloration varient avec le 

 résultat que l'on veut obtenir. C'est ainsi qu'on arrive à 

 colorer les spores, qui, à l'état ordinaire, se colorent 

 mal, en les traitant d'abord par l'acide sulfurique, puis 

 en les soumettant à une chaleur sèche de 120» pendant 

 une demi-heure. 



C'est grâce à ces méthodes spéciales que l'on a pu dé- 

 couvrir les cils vibratiles des microbes, cils dont la pré- 

 sence était autrefois absolument inconnue. Nous n'en 

 citerons qu'une, celle de Nicolle et Morax. Les lamelles, 

 simplement desséchées, sont traitées par une goutte 

 d'un bain mordant, contenant du tanin à l'éther, du 

 sulfate ferreux et de la fuchsine. On chauffe une dizaine 

 de secondes sur une petite flamme. Dès que les vapeurs 

 apparaissent, on lave. On recommence deux ou trois 

 fois la même opération, puis on colore à la fuchsine. 



De cette façon, on voit que les Microbes mobiles pos- 

 sèdent, suivant les espèces, un nombre variable de cils 

 vibratils, en général d'une longueur remarquable; les Mi- 

 crobes immobiles en sont dépourvus, ce qui prouve qu'ils 

 sont bien les agents du mouvement. 



Les vibrions cholériques ont tantôt un cil unique 

 situé à une extrémité, tantôt deux cils à chaque extré- 

 mité. Le Bacillus coli en a de quatre à cinq. Le bacille 

 typhique en est souvent couvert.' Chez un ferment ni- 

 treux, les cils ont vingt à trente fois la longueur des élé- 

 ments microbiens. Ils sont en général fragiles, rarement 

 rectilignes, plus ou moins plexueux. Ajoutons, à leur 

 propos, que s'ils suivent ces mouvements, ils n'en sont 

 pas les agents exclusifs : c'est ainsi que les microbes de 

 grande taille n'en possèdent pas, mais se déplacent 

 néanmoins par des contractions protoplasmiques. 



