LE NATURALISTE 



MICROGRAPHIE 



TECHNIQUE HISTOLOGIQUE 



La Liqueur de Pacini consiste en un mélange de 

 sublimé avec le double de son poids de sel de cuisine, 

 auquel on ajoute une quantité d'eau plus ou moins con- 

 sidérable suivant le titre de la solution que l'on veut 

 obtenir et l'usage que l'on désire en faire. 



Le Liqueur de Ripart et Petit peut également servir 

 comme agent conservateur. 



La Liqueur de Gilson spéciale pour la conservation des 

 préparations est formée de : 



Eau distillée 30 gr. 



Alcool à 70» 60 gr. 



Glycérine 30 gr. 



Sublimé gr. 15 



Acide acétique à 15 0/0 2 ce. 



Cette liqueur ne doit être employée que pour la conser- 

 vation de tissus ayant été d'abord préalablement fixés 

 avec beaucoup de soin. C'est un milieu recommandé 

 toutes les fois que l'on désire étudier la structure du 

 protoplasme ou du noyau. 



Nous ne ferons que signaler en terminant : le Vert de 

 Méthyle auquel on ajoute une trace d'acide osmique et le 

 Picro-carmin qui est à la fois un agent fixateur, colorant 

 et conservateur des tissus, mais nous sommes loin de les 

 préconiser. 



Certainement ils peuvent dans certains cas rendre 

 4uelques services, mais il ne faut pas leur demander 

 beaucoup. 



Lutage des préparations. — Lorsqu'on a versé sur les 

 coupes quelques gouttes du milieu conservateur que l'on 

 a choisi, il faut, dans la majorité des cas, recouvrir le tout 

 à l'aide d'une lamelle. 



Les lamelles couvre-objet ont des formes, des dimen- 

 sions, des épaisseurs et des formes variables et chacun 

 emploie ce qui lui convient. Quelques conseils ne seront 

 peut-être pas inutiles, malgré cela. 



Nous nous servons de deux dimensions de lamelles : les 

 unes petites 22/22°"" nous servent aux usages courants, 

 pour l'examen à plat des tissus ou autres, mais jamais 

 pour des préparations sérieuses. Si nous employons les 

 petites à ces usages courants, c'est tout simplement parce 

 qu'elles coûtent bon marché et qu'on en casse beaucoup 

 dans une année de recherches. 



Pour les préparations plus sérieuses et à conserver, 

 nous n'employons que les grandes lamelles rectangu- 

 laires 22/32'»°'. Elles sont commodes, car on peut faire 

 entrer un certain nombre de coupes au-dessous, et autant 

 que possible nous n'employons qu'une lamelle par lame 

 laissant tout le reste de la lame pour les indications de 

 l'étiquette. 



Lorsqu'on place les coupes sur la lame, il faut autant 

 que possible ne pas s'exposer à dépasser les limites de la 

 lamelle que l'on désire employer ultérieurement; pour 

 cela on se sert d'un instrument appelé du nom pompeux 

 de photophore et qui consiste tout simplement en un 

 bloc de bois cubique, évasé obliquement suivant l'une de 

 ses faces sur laquelle on colle un morceau de miroir, sur 

 la partie supérieure est collé un simple morceau de verre 

 à vitre sur le milieu duquel on a marqué à l'encre ou 

 même au diamant, les dimensions de ses lamelles. On 



place Ja lame sur laquelle on veut coller les coupes, 

 au-dessus du cadre fixé pour la lamelle et l'on peut faire 

 ainsi pour les coupes sans s'exposer à dépasser les limites 

 de la lamelle. 



Il y a des photophores beaucoup plus compliqués mais 

 nous trouvons que le précédent l'est déjà trop, aussi nous 

 abstiendrons-nous de les décrire, d'autant plus qu'on peut 

 parfaitement obtenir les mêmes résultats en traçant tout 

 simplement sur une feuille de papier blanc ou noir un 

 cadre de la dimension des lamelles à employer et en pla- 

 çant dessus, la lame préparée pour recevoir les coupes. 



C'est le procédé dont nous nous servons et quoique 

 très primitif, nous le trouvons excellent. 



J'ai dit que le plus souvent on recouvre la préparation 

 et le liquide conservateur d'une lamelle, mais on peut et 

 même on doit s'en dispenser dans certains cas spéciaux, 

 à la condition toutefois d'employer un milieu à base de 

 Dammar ou mieux encore de Baume. 



C'est par exemple ce qui arrive dans les coupes de pré- 

 parations faites suivant les méthodes de Golgi ou de 

 Ramon y Caja l. 



Quand on emploie des résines et une lamelle, ou peut 

 parfaitement se dispenser de luter les préparations, à la 

 condition d'employer le baume ou le dammar en solu- 

 tion semi-iïuide seulement, surtout pas trop liquide, il 

 est préférable qu'elle soit plutôt légèrement solide que 

 trop fluide, car dans ce cas, lorsque le dissolvant s'est 

 évaporé, il peut se produire des vacuoles qui se rem- 

 plissent d'air et qui détériorent absolument la prépa- 

 ration. 



Toutes les fois que le liquide conservateur est suscep- 

 tible de s'évaporer facilement, le lutage doit être fait très 

 soigneusement faute de quoi, au bout d'un temps très 

 court, les préparations se dessèchent et ne sont plus 

 bonnes à rien. 



Nous ne saurions trop attirer l'attention sur cette opé- 

 ration futile en apparence, mais grâce à laquelle, on 

 peut, si elle a été bien faite, étudier des préparations, 

 bien des années après qu'elles ont été faites et c'est là, 

 souvent, un avantage précieux qui peut éviter une bien 

 grande perte de temps. 



Le meilleur lut est celui qui adhère le plus intimement 

 au verre. 



Toutes les fois que le milieu conservateur est très 

 liquide (c'est-à-dire en somme tous, excepté ceux à base 

 de résine) on doit primitivement faire ce que l'on appelle 

 une cellule qui, naturellement doit avoir la forme et les 

 dimensions de la lamelle que l'on désire employer. 



On trouve dans le commerce des lames où les cellules 

 sont toutes préparées, mais il est bon de savoir soi-même 

 les préparer. Les coupes ou autres préparations sont 

 placées dans les limites de la cellule, on ajoute le liquide 

 conservateur, on recouvre d'une lamelle et on lute, telle 

 est la marche à suivre dans ce cas. 



Préparation de la cellule. — Les lames sur lesquelles 

 on veut préparer des cellules doivent être bien lavées à 

 l'alcool et bien essuyées, ce n'est qu'alors qu'on peut les 

 placer sur la tournette. 



La Tournette se compose d'un châssis en bois échancré 

 d'un côté suivant un angle dièdre droit et, de l'autre, plus 

 élevé de façon à pouvoir appuyer la main. 



La partie échancrée porte, sur son plan horizon- 

 tal, un plateau mobile sur un axe vertical. Ce plateau est 

 circulaire et porte sur sa périphérie deux valets qui 

 servent à fixer la lame dans une position déterminée. 



