LE NATU 



2 siestes et 2 nuits de sommeil ; dans nos climats tem- 

 pérés, 2 nuits de sommeil seulement ; et enfin sous les 

 pôles, 1 seule sieste journalière en été et nocturne en 

 hiver. 



Ce serait bien plus naturel que d'obliger les gens à se 

 coucher, au moins une fois en 24 heures, sur toute la 

 surface de la terre. En effet, à d'autres conditions clima- 

 matériques ou astronomiques, il faut nécessairement 

 d'autres mœurs et d'autres habitudes, en un mot d'autres 

 usages. 



D r Bougon. 



MICROGRAPHIE 



TECHNIQUE HISTOLOGIQUE 



CHAPITRE III 



MÉTHODES SPÉCIALES POUR LES PARTIES CALCIFIÉES, 

 CHITINISÉES OU PIGMENTÉES 



Les tissus internes des animaux sont parfois, souvent 

 même, protégés par une enveloppe résistante formée soit 

 de chitine, soit de calcaire, réunis la plupart du temps 

 chez le même individu. Les procédés ordinaires de fixa- 

 tion ne peuvent être alors employés, car le revêtement 

 externe empêcherait les liquides fixateurs de pénétrer. 

 On doit alors s'adresser à des réactifs spéciaux qui, en 

 dissolvant le calcaire ou ramollissant suffisamment la 

 chitine, permettent la pénétration des agents fixateurs ou 

 colorants. 



Décalcification. — D'une façon générale tous les acides 

 minéraux et quelques acides organiques sont des agents 

 décalcifiants, en ce sens ^qu'ils forment avec la chaux 

 du carbonate un sel plus ou moins soluble et mettent 

 l'acide carbonique en liberté. 



L'un des meilleurs réactifs décalcifiants est l'acide 

 azotique, en ce sens qu'il est aussi un agent fixateur 

 ainsi que nous l'avons vu dans le chapitre précédent. 



On doit l'employer en solution de 1 à 5 0/0 dans IPO 

 distillée, mais il est imprudent de dépasser cette der- 

 nière proportion. La quantité de mélange doit être con- 

 sidérable par rapport au volume de l'objet à décalcifier. 

 Il en est de même, du reste, pour les autres réactifs. 



Après le traitement par la solution d'acide nitrique, 

 les objets doivent être soigneusement lavés, d'abord à 

 l'eau, puis à l'alcool fort. 



La solution nitrique peut être faite aussi avec l'alcool 

 à 70°, la fixation se fait mieux, mais l'action décalci- 

 fiante se trouve ralentie. 



Nous avons obtenu d'excellents résultats en employant 

 le mélange suivant : 



A. azotique à 3 0/0 5 parties 



A. osmique à 1 0/0 1 — 



mais on peut varier les proportions de l'un et de l'autre 

 réactif, suivant les objets à traiter. 



Autant que possible, il vaut mieux fixer préalable- 

 ment les pièces qui présentent, outre la portion calcifiée, 

 des tissus ordinaires plus fragiles, mais le mélange d'à. 

 azotique et d'à. osmique permet précisément d'éviter la 

 fixation préalable. 



L'acide chlorhydrique employé en solution aqueuse ou 

 alcoolique de 1 à ï> 0/0 est un décalcifiant très rapide ; 



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mais il est défectueux, ou tout au moins son action 

 demande à être soigneusement surveillée, car il produit 

 des gonflements parfois considérables, provoquant leplus 

 souvent des déchirures dans les tissus. 



L' 'acide picrique, en solution concentrée dans l'eau ou 

 l'alcool, est un bon fixateur, mais son action décalcifiante 

 est relativement faible. 



h' acide chronique possède une action très lente. Il 

 provoque aussi des gonflements. On ne l'emploie guère 

 qu'en solution à 1 0/0. 



Enfin l'acide acétique serait un très bon réactif décal- 

 cifiant ; mais il a le grand défaut de désorganiser facile- 

 ment les tissus dès qu'on veut l'employer en solution un 

 peu forte. On est obligé d'avoir recours à des solutions 

 très faibles. 



Déchitinisation. — Le mot de déchitinisation que nous 

 employons est en réalité impropre, car il ne faut pas 

 songer à enlever la chitine d'un tissu sans détruire le 

 tissu lui-même ; seulement on peut arriver à la ramollir 

 suffisamment pour la rendre perméable aux réactifs 

 colorants. 



Il n'y a guère qu'un réactif pratique pour atteindre ce 

 résultat, c'est Veau de Javel. 



Lorsqu'on veut enlever complètement^ chitine, il n'y 

 a qu'à traiter par l'eau de Javel concentrée et bouillante; 

 mais, ainsi que nous venons de le dire, les éléments his- 

 tologiques sont fatalement détruits en même temps. 



Une solution de potasse caustique concentrée et bouil- 

 lante arrive aussi aux mêmes résultats; elle commence 

 à décolorer la chitine sans l'attaquer; mais, si l'on fait 

 bouillir longtemps, la chitine disparait, elle même, peu 

 à peu. 



Lorsqu'à la portion chitinifiée est accolée une partie 

 renfermant des éléments histologiques délicats, on peut 

 obtenir la perméabilité de la chitine sans nuire le moins 

 du monde au tissu de la façon suivante : 



On allonge l'eau de Javel de cinq à dix fois son volume 

 d'eau distillée suivant la fragilité du tissu et l'on chauffe 

 très légèrement à la platine chauffante. Il est bon de 

 suivre à la loupe ou au microscope les progrès de la 

 réaction. Quand la chitine est devenue parfaitement 

 transparente et a perdu de son épaisseur, on arrête la 

 réaction en jetant la pièce dans de l'eau distillée ou dans 

 l'alcool à 70°. 



Par ce procédé, la chitine est devenue suffisamment 

 molle et transparente et se laisse facilement pénétrer 

 par les réactifs colorants, et cela, sans que les éléments 

 histologiques, aussi délicats soient-ils, aient eu à souffrir 

 de ce fait. 



Dépigmentation. — Il arrive parfois que certains élé- 

 ments, dont on veut faire l'étude se trouvent placés au 

 milieu de granulations pigmentaires de couleurs diverses, 

 mais qui ont pour effet de gêner considérablement l'ob- 

 servateur ou même de voiler totalement les parties à étu 

 dier. Il est alors indispensable de décolorer le pigment 

 On y arrive par des procédés différents, mais qui ne sont 

 pas tous facilement applicables. 



Il importe d'abord de faire remarquer que tous les 

 tissus que l'on veut décolorer doivent être préalablement 

 bien fixés. Il arriverait, sans cela, que les éléments histo- 

 logiques seraient détruits ou tout au moins considérable- 

 ment endommagés par le réactif. 



Toutes les préparations à hase de chlore sont, sans 

 contredit, les plus efficaces; mais, comme elles désorga- 

 nisent facilement les tissus, il est important de suivre la 



