LE NATURALISTE 



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Si à l'état de ver cette espèce nous est nuisible en détruisant 

 les larves rhizophages et coprophages chargées de disséminer 

 dans le sol, qu'ils fertilisent ainsi, des matières azotées, des 

 déjections de toute sorte, elle compense, a l'état parfait, ces 

 méfaits en nous débarassant d'une multitude d'insectes, de 

 larves et de chenilles toutes plus ou moins nuisibles à l'agri- 

 culture. 



Capitaine Xambeu. 



MICROGRAPHIE 



TECHNIQUE HISTOLOGIQUE 



CHAPITRE IV 



méthodes de coloration. — réactifs colorants 

 principaux. — de quelques méthodes spéciales 

 d'investigation. 



Les tissus animaux étant en général hyalins, il serait 

 difficile de les observer directement au microscope, sou- 

 vent même complètement impossible ; de là, la nécessité 

 de les imprégner d'une substance colorante appropriée, 

 qui, se fixant sur les divers éléments, et les faisant tran- 

 cher par la teinte qu'ils ont prise, sur le fond clair du 

 miroir réflecteur du microscope, permette ainsi un 

 examen plus commode de l'ensemble de la préparation. 



Les réactifs colorants employés dans la technique his- 

 tologique actuelle peuvent se diviser en deux grands 

 groupes: les colorants yénéraux, qui agissent d'une façon 

 uniforme sur les tissus ou, si l'on préfère, sur les diffé- 

 rents éléments qui les constituent, et les colorants spé- 

 ciaux qui se fixent de préférence sur telle ou telle espèce 

 de tissus ou même sur telle ou telle partie des éléments 

 qui les forment, mais seulement lorsqu'ils sont placés 

 dans des conditions déterminées. Il est à remarquer, en 

 effet, que la plupart des colorants dits spéciaux devien- 

 nent des colorants généraux lorsqu'on les emploie en 

 trop grande quantité ou lorsqu'on les laisse agir trop 

 longtemps. 



Mais, employés en solution étendue ou en les laissant 

 agir le temps voulu, on remarque alors qu'ils sont doués 

 à'unpouvoir électif remarquable qui n'existe pas pour les 

 colorants généraux placés dans les mêmes conditions. 



Les divers réactifs colorants, généraux ou spéciaux, 

 peuvent s'employer soit à l'état de mélange, soit séparé- 

 ment ; mais, dans ce dernier cas, on doit toujours faire 

 agir d'abord le colorant spécial, puis, en dernier lieu, le 

 colorant général, après s'être assuré par un examen 

 microscopique rapide que les éléments déterminés ont 

 bien été colorés par le premier réactif. 



On peut, bien entendu, éviter cet examen, lorsqu'on 

 connaît exactement la quantité de colorant à employer 

 et la durée de son action. 



Tous les tissus à colorer doivent préalablement avoir 

 été soigneusement fixés et lavés, comme nous l'avons 

 indiqué précédemment, et la matière active ne doit pas 

 être quelconque, sans quoi l'on s'expose à de graves 

 mécomptes. Tel ou tel colorant qui ne réussit pas après 

 l'action de tel ou tel agent fixateur, devra par conséquent 

 être soigneusement écarté. 



Dans le courant de ce chapitre, nous dirons toujours 

 quelles sont les teintures qu'il convient le mieux d'em- 



ployer après l'action des divers réactifs fixateurs que 

 nous avons déjà passés en revue. 



Nous avons établi, comme principe, que toutes les 

 pièces à colorer doivent préalablement avoir été fixées. 

 Il y a cependant quelques exceptions. Certaines matières 

 colorantes jouissent, en effet, de l'importante propriété 

 de se fixer sur certains tissus pendant la vie même de 

 l'animal. 



Ces colorations sur le vivant sont précieuses en cer- 

 tains cas, aussi leur consacrerons- nous un paragraphe 

 spécial à la fin de ce chapitre. 



Les pièces histologiques peuvent être colorées de deux 

 façons : ou en masses, c'est-à-dire entières, non coupées, 

 ou après la coupe et alors sur lames. 



Tout ce qui sera dit dans le présent chapitre s'applique 

 aux colorations en masses. 



Les méthodes de coloration sur lames seront étudiées 

 dans un autre chapitre. 



Nous placerons en première ligne le Carmin, car c'est 

 lui qui a été employé le premier en zoologie. Il est très 

 soluble dans l'eau avec laquelle il forme une solution 

 légèrement alcaline. 



On s'est servi, autrefois, beaucoup du carmin en solu- 

 tion aqueuse, on y a à peu près renoncé aujourd'hui, et 

 l'on préfère se servir de l'un des réactifs que nous allons 

 maintenant indiquer, 



Le Carmin, ammoniacal ou Carminatc oV ammoniaque 

 est tout simplement du carmin dissous à saturation dans 

 l'ammoniaque et filtré. On lave ensuite les pièces à l'eau 

 distillée, puis à l'alcool à 70°. Ce réactif pénètre assez 

 bien les tissus ordinaires. 



Le Carmin aluné ou de Grenadier se prépare en faisant 

 dissoudre du carmin à 40° pulvérisé dans une solution 

 concentrée d'alun de potasse ou d'ammoniaque, jusqu'à 

 ce que l'on obtienne un mélange de couleur rouge foncé. 



11 est bon d'ajouter quelques gouttes d'acide phénique 

 pour empêcher le développement des moisissures. 



On filtre et l'on obtient ainsi une liqueur très em- 

 ployée pour colorer en masse les tissus, avec cependant 

 un pouvoir électif pour les noyaux. La pénétration se 

 fait assez lentement, mais Ilenneguy recommande, pour 

 l'activer, d'ajouter au mélange quelques gouttes d'acide 

 acétique. 



Le Picro-carmin s'obtient en versant du carmin ammo- 

 niacal saturé dans une solution également saturée 

 d'acide picrique. On évapore lentement le mélange jus- 

 qu'à ce qu'il n'en reste plus guère que le cinquième. 



On laisse refroidir la liqueur et on filtre. Le liquide 

 qui passe, .évaporé à sec, donne une poudre de couleur 

 rouge orangé, qui est lè picro-carmin. 



On l'emploie, en général, en solution de 1 à 3 0/0 dans 

 l'eau distillée ou l'alcool. On a ainsi un réactif suffisam- 

 ment pénétrant, ayant un pouvoir électif pour les 

 noyaux qu'il colore en rouge, tandis que le reste des élé- 

 ments cellulaires prend une teinte rouge orange plus ou 

 moins foncé. 



On peut l'employer pour ainsi dire après tous les fixa- 

 teurs, mais il réussit admirablement après les fixations 

 à base de sublimé. 



Le Carmin au borax se prépare en faisant dissoudre, 

 dans une solution concentrée de borate de soude, du 

 carmin à 40° pulvérisé, jusqu'à ce que l'on obtienne une 

 coloration intense. On ajoute alors un volume égal d'al- 

 cool à 70°, puis on laisse reposer et l'on filtre. 



Ce colorant convient après tous les fixateurs, à la con- 



