LE NATURALISTE 



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on ne doit pas les passer dans les éclaircissants, mais seule- 

 ment dans la série des alcools afin de les déshydrater 

 plus ou moins complètement. 



Après déshydratation on place les pièces dans de l'éther 

 pur ou dans un mélange à parties égales d'éther et d'al- 

 cool absolu, de façon qu'elles s'en imprègnent par- 

 faitement. Puis on prépare deux solutions de collodion 

 ou de eëlïoïdine dans l'éther ou le mélange d'éther et 

 d'alcool : l'une, très liquide, dans laquelle on place d'abord 

 les pièces au sortir du premier mélange, de façon à 

 commencer par une pénétration facile du collodion ou 

 de la celloïdine ; l'autre, au contraire, très épaisse, où les 

 pièces sont placées en dernier lieu. 



Il est inutile d'ajouter que ces mélanges doivent être 

 toujours tenus dans des flacons bien bouchés à l'émeri. 



La pénétration se fait dans le dernier milieu d'une 

 façon extrêmement lente, au bout de plusieurs jours 

 seulement, si les pièces sont tant soit peu volumineuses. 



Quand elles ne doivent être coupées que plus tard, on 

 peut les laisser impunément dans le dernier mélange et 

 les retirer seulement au moment de s'en servir. 



Pour cela, il faut verser la masse au collodion ou à la 

 celloïdine contenant les objets à couper dans des moules 

 en acier ou en papier (que l'on peut faire soi-même) et 

 placer le tout dans de l'alcool faible ou du chloroforme. 

 L'ensemble se prend alors en une masse solide de forme 

 voulue, mais que l'on peut du reste modifier facilement 

 au scalpel si cela est nécessaire, la pièce histologique se 

 trouvant au centre du bloc. Avant la coagulation com- 

 plète, on oriente la pièce, c'est-à-dire qu'on la place dans 

 une position telle, par rapport à l'un des axes du bloc, 

 qu'il soit ensuite facile de se reconnaître pour la couper 

 dans telle ou telle direction, plutôt que dans telle ou 

 telle autre. 



D'ordinaire, on fixe le bloc sur un bouchon que l'on 

 pincera ensuite dans les mors du microtome, aussi est-il 

 avantageux de le fixer tout en le préparant, les deux 

 opérations se font ainsi en même temps. 



Pour cela, on prend un bouchon de la grosseur voulue 

 pour qu'il s'adapte au microtome, puis on l'entoure d'un 

 cylindre' en papier qui dépasse à l'une des extrémités. 

 On mouille préalablement le papier seul d'alcool faible, 

 puis on verse, dans le cylindre ou tronc de cône ainsi 

 formé au-dessus du bouchon, le mélange contenant le 

 collodion ou la celloïdine et la pièce à inclure. On oriente 

 celle-ci et on verse par-dessus de l'alcool faible ou du 

 chloroforme, ou mieux on immerge le tout dans ce 

 liquide, en conservant le bouchon dans la position ver- 

 ticale. 



Le bloc une fois solidifié est suffisamment attaché au 

 bouchon pour permettre de couper. Si l'on ne veut pas 

 procéder immédiatement à cette opération, on le conserve 

 dans de l'alcool faible ou du chloroforme, le temps voulu. 



A côté du collodion et de la celloïdine, il faut citer une 

 autre substance laphotoxyline, aujourd'hui très employée. 

 Elle présente l'avantage d'être beaucoup plus transpa- 

 rente encore que les deux premières. Son mode d'emploi 

 est du reste le même que celui que nous venons de dé- 

 crire. 



On peut faire aussi des inclusions à froid avec la 

 gomme arabique, la gomme copal, la gomme laque, etc., 

 mais nous nous en tiendrons ici aux procédés déjà décrits 

 et qui sont du reste les meilleurs et les plus employés. 



Les Inclusions à la Paraffine sont, à notre avis, préfé- 

 rables aux précédentes, maïs elles exigent l'intervention 



de la chaleur et d'instruments spéciaux, bains-marie ou 

 éluves, destinés à maintenir la paraffine liquide et à un 

 degré suffisamment élevé pour lui permettre de bien pé- 

 nétrer les objets qui y sont immergés. 



Le degré de température doit être à peine au-dessus 

 de celui de fusion de la paraffine employée et il doit être 

 maintenu constant pendant toute la durée de l'opération, 

 sans quoi, si la température baisse, la paraffine se soli- 

 difie ; si au contraire elle s'élève un peu trop, on risque 

 de cuire ses préparations. 



La paraffine que l'on rencontre dans le commerce 

 sous la forme de masses blanches solides, fond à des 

 températures comprises, environ entre 45 et 55°. Le point 

 de fusion doit être soigneusement vérifié avant d'em- 

 ployer le corps pour une inclusion. Autant que possible 

 n'employer que de la paraffine vieille ayant déjà subi 

 plusieurs fusions successives. Elle est bien meilleure, 

 en ce sens qu'elle ne cristallise que difficilement par le 

 refroidissement et qu'elle ne contient pas de bulles d'air. 



L'été, il est bon de prendre une paraffine dure ne fon- 

 dant qu'entre 50 ou 55° ; l'hiver, on peut la prendre plus 

 molle, fondant entre 45 et 50°. 



Le choix du point de fusion doit être fait aussi selon la 

 nature des objets à inclure. Il est évident que si l'on 

 cherche à couper un corps dur inclus dans une masse 

 molle, on a peu de chances de réussir. 



Quand les objets ont été déshydratés, puis éclaircis,on 

 ne doit pas les mettre brusquement dans de la paraffine 

 pure. Il faut autant que possible les passer préalablement 

 dans un mélange à poids égaux, à peu près, de Paraffine 

 et de Xylol ou de Chloroforme. On les y laisse (sur le 

 dessus de l'étuve de préférence) jusqu'à ce qu'ils soient 

 bien imprégnés, ce qui se reconnaît en général, au 

 moins pour les petits objets, en ce qu'ils tombent alors 

 au fond du vase. 



On les place ensuite dans la paraffine liquide jusqu'à 

 ce que la pénétration des tissus soit complète, ce qui 

 demande de une ou deux à vingt-quatre heures suivant 

 le volume des pièces et leur constitution. 



Dans la plupart des cas, la pénétration se fait bien ; 

 mais lorsqu'il existe dans les tissus des lacunes plus ou 

 moins remplies d'air, celui-ci ne s'échappe pas facilement 

 même dans la paraffine, et l'on est alors obligé d'avoir 

 recours au vide. On place les objets dans de la paraffine 

 tenue liquide par un procédé quelconque, sous le réci- 

 pient d'une machine pneumatique, on fait le vide et la 

 pénétration a lieu alors très rapidement. 



Lorsqu'on croit que les pièces sont suffisamment im- 

 prégnées, on fait les blocs, en versant la paraffine et les 

 pièces dans un des moules ad hoc dont nous parlerons 

 plus loin. On ne doit jamais attendre que la solidification 

 se fasse lentement, sans quoi il se produit presque tou- 

 jours uue cristallisation gênante, surtout si l'on a affaire 

 à delà paraffine fraîche. Pour éviter cela, il faut plonger 

 le tout dans l'eau froide : la solidification se fait alors 

 brusquement et la cristallisation est souvent évitée. 



L'orientation de la pièce doit être faible immédiate- 

 ment à la sortie de l'étuve et avec des aiguilles chauffées ; 

 cela, bien entendu, le plus rapidement possible. 



Au lieu d'employer la paraffine seule, on peut faire un 

 mélange de dix parties de paraffine pour une partie de 

 cire blanche ou de cire jaune, on obtient ainsi un corps 

 peut-être plus homogène. 



Gruvel. 



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