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LE NATURALISTE 



Le modo opératoire est maintenant le suivant : On 

 prend à l'aide d'une aiguille plate ou d'un agitateur, une 

 toute petite quantité de crachat dans sa partie la plus pu- 

 rulente et on l'étend sur une lamelle bien nettoyée. On 

 applique alors une seconde lamelle sur la première, de 

 façon à bien étendre la matière à étudier. Cela fait, on 

 sépare les lamelles au moyen de pinces et on les passe 

 rapidement deux ou trois fois dans la flamme d'un bec 

 Bunsen afin de coaguler l'albumine. 



On place les lamelles sur une platine chauffante, 

 maintenue à 30 ou 35°, et on répand dessus le mélange 

 colorant de façon que la lamelle soit entièrement cou- 

 verte. On laisse le colorant agir pendant dix minutes 

 environ, de façon à obtenir une surcoloration, puis on 

 décolore en passant les lamelles, soit dans l'acide ni- 

 trique mélangé avec deux ou trois fois son poids d'eau 

 distillée, soit encore dans un mélange de une partie 

 d'acide nitrique pour cinq parties d'alcool absolu. 



On arrête la décoloration en lavant à l'eau distillée. On 

 peut à la rigueur s'en tenir là, si l'on veut, et monter 

 dans le baume comme nous allons l'indiquer, les bacilles 

 sont alors colorés en rouge. Mais il est de beaucoup pré- 

 férable de faire une seconde coloration des lamelles à 

 l'aide d'une solution de bleu de méthylène dans un mé- 

 lange à volumes égaux d'eau et d'alcool à 95° ou tout 

 simplement dans l'alcool à 60°. 



De cette façon, les bacilles sont colorés en rouge, 

 tandis que les tissus environnants et les autres microbes, 

 s'il y en a, se colorent en bleu. 



La coloration étant terminée, on dessèche les lamelles 

 en les chaull'ant légèrement; quand toute 1 eau a dis- 

 paru, on verse sur une lame une goutte de baume de 

 Canada et on renverse la lamelle préparée dessus, en 

 comprimant légèrement de façon à bien étendre le 

 baume. 



Les préparations ainsi faites peuvent être immédiate- 

 ment observées au microscope et même conservées assez 

 longtemps, si on le désire. 



Dans les méthodes de coloration sur lames, on fait, en 

 général, un assez grand nombre de préparations à la 

 fois. On a fait un grand nombre de petits appareils 

 en forme de boîtes, de tubes, etc., qui permettent de 

 placer plusieurs lames à la fois dans un milieu colo- 

 rant ou autre, un des appareils les plus pratiques, et 

 des moins chers est le porte-tubes du D r Borel (fig. 40 

 et 44). 



Jl se compose d'un bloc de bois de chêne, portant sur 

 sa face supérieure un certain nombre de trous dans les- 

 quels on peut placer des tubes en verre, cylindriques, de 

 3b millimètres de diamètre et fermés chacun par un cou- 

 vercle également en verre, à l'exception de l'un d'eux 

 dont le couvercle est métallique et porte du côté interne 

 une série de six pinces métalliques pouvant recevoir 

 chacune une lame porte-objet. 



Quand les lames sont ainsi fixées au-dessous de ce cou- 

 vercle spécial, on peut les placer alternativement dans 

 chacun des tubes où elles sont appelées à subir des pré- 

 parations diverses. 



Lorsqu'on désire faire un certain nombre de colora- 

 tions sur lames en mettant le liquide colorant sur la lame 

 même, on a quelquefois besoin de prolonger le contact 

 assez longtenips. On se sert alors de petits appareils 

 spéciaux appelés chambres humides. 



Une chambre humide se compose d'une cuvette en 

 verre sur laquelle repose une cloche également. Sous la 

 cloche on place un support quelconque destiné à rece- 

 voir les lames préparées (fig. 43 et 44). 



On verse un peu d'eau dans la cuvette et en recouvrant 

 les préparations avec la cloche, on fait ainsi une chambre 

 saturée d'humidité et où, par conséquent, l'évaporation 

 du liquide colorant ne peut pas se produire. 



Pour pouvoir se servir de ce mélange, il faut préparer 

 les lames au moins 48 heures avant de coller les prépa- 

 rations. 



On place les coupes sur une bande de papier de soie 

 satiné, on les renverse sur la lame préparée en appuyant 

 légèrement; les coupes se collent et l'on peut alors en- 

 lever le papier, puis traiter par les colorants. 



2° Pour coupes de blocs à la paraffine. — Les meilleurs 

 mélanges que l'on puisse employer dans ce cas, sont 

 ceux à base d'albumine ou de collodion. 



Mélange à base d'albumine. — Un des meilleurs agents 

 que nous connaissions est l'albumine de Maycr dont la 

 préparation est extrêmement simple, ce qui est encore 

 un avantage. 



On prend un poids égal de blanc d'oeuf et de glycérine 

 que l'on mélange bien en y ajoutant 1 % du poids du 

 mélange de salicylate de soude. Après avoir remué sou- 

 vent et très fortement le tout, on filtre. 



La liqueur ainsi obtenue doit être employée en quan- 

 tités extrêmement faibles et bien étendue sur la lame 

 en frottant avec la pulpe d'un doigt ou un peu de papier 

 buvard. Les coupes une fois placées doivent être forte- 

 ment collées en pressant avec précaution à l'aide d'un 

 pinceau bien sec. Les lames ainsi préparées sont alors 

 placées dans l'essence de thérébentine ou le xylol, afin 

 de dissoudre la paraffine d'enrobage. 



Si les coupes sont déjà colorées, on peut alors monter 

 directement dans le baume, en ayant soin de bien 

 égoutter l'essence de térébenthine. 



P. Gruvel. 



Les Végétaux Épiphylles 



Dans la forêt équatoriale où les pluies abondantes, la 

 régularité de la température et le calme de l'air main- 

 tiennent une atmosphère constamment humide, beau- 

 coup de petits végétaux (Algues, Champignons, Lichens, 

 Hépatiques, Mousses) ont pu quitter le sol et s'établir 

 sur les branches, voire sur les feuilles des arbres. Ces 

 épiphylles, au sujet desquelles M. J. Massart vient de 

 publier un intéressant travail (1) que nous allons ana- 

 lyser, sont parfois des espèces qui, par hasard, ont trouvé 

 sur quelque grande feuille des conditions favorables ; 

 telles sont diverses Orchidacées et Fougères qui vivent 

 d'habitude en épiphytes, mais qui, dans l'humide et 

 calme forêt vierge, peuvent passer toute leur existence 

 sur une feuille. Parmi les épiphylles occasionnels on 

 peut encore citer les Infusoires, les Rotifères et les 

 Nématodes qui nagent dans les grosses touffes spon- 

 gieuses constituées sur les feuilles par les Mousses et 

 les Hépatiques. 



Les épiphylles, dit M. Massart, n'habitent pas indis- 



(1) Annales du Jardin botanique de Buitenzorg. 



