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« E nel nostro caso la separazione perfetta delle siero albumine dalle 

 globuline era resa assolutamente necessaria dal fatto già da noi stabilito (') 

 che l'antitossina del tetano, anche in piccolissima quantità, basta a scom- 

 porre il veleno del tetano. 



« Al fine di separare completamente il precipitato ottenuto coi due pro- 

 cessi sopraindicati, abbiamo ricorso perfino a filtrazione attraverso piccole can- 

 dele Chamberland. In tal modo eravamo infatti riusciti ad ottenere un filtra- 

 to perfettamente limpido, che non aveva alcuna azione sul veleno del te- 

 tano. Per altro, essendoci noto che queste candele in principio della filtra- 

 zione trattengono oltre le sostanze solide, anche talune di quelle disciolte 

 nel liquido filtrante, e d'altronde non potendo disporre nelle varie prove che 

 dovevamo fare, altro che di piccole quantità di siero per ciascuna, così per 

 stabilire se i risultati da noi ottenuti coi liquidi filtrati attraverso porcel- 

 lana fossero attendibili oppur no, abbiamo cercato se una piccola quantità 

 di siero di sangue del cane immune filtrata per candela Cbamberland con- 

 servasse o no la sua azione contro il veleno del tetano. Ed avendo trovato 

 che le piccole quantità di siero perdono, passando attraverso il filtro di por- 

 cellana, del loro potere antitossico, non abbiamo potuto tener verun conto 

 dei risultati che avevamo ricavati colla filtrazione del siero in cui le globu- 

 line erano state precipitate nei due modi indicati. 



« Peraltro, fra i diversi processi da noi sperimentati, uno ci ha dato 

 risultati netti, positivi, e ci ha permesso quindi di trarre delle conclusioni 

 rapporto alla prima questione propostaci; questo è stato il metodo di Ham- 

 marsten della precipitazione delle globuline col solfato di Magnesia. 



« Per eseguire questo processo abbiamo preso 1 ce. di siero di sangue 

 del cane immune e vi abbiamo aggiunto solfato di magnesia in cristalli fino 

 a che una parte di questi, alla temp. di 30° C. della stufa, rimanesse in- 

 disciolta nel fondo della provetta. Trascorso il tempo necessario perchè si se- 

 parasse il precipitato, abbiamo filtrato alla stessa temperatura, lavato lun- 

 gamente il filtro con soluzione satura di solfato di magnesia, e finalmente, 

 tanto il filtrato quanto il precipitato (questo sospeso in poca acqua distillata 

 sterilizzata) li abbiamo messi, per eliminarne i sali, a dializzare alla temp. 

 di 35° C, in due piccoli dializzatori, contro molta acqua, servendoci sempre in 

 questa operazione di vasi e di liquidi sterili. Per ultimo, sia il liquido fil- 

 trato, sia il precipitato, nel quale le globuline dopo la dialisi erano state 

 disciolte per aggiunta di una goccia di soluzione di carbonato sodico, furono 

 messi per 2 ore in contatto con \- ce. di cultura di tetano filtrata e quindi 

 iniettati sotto la cute nella coscia di due conigli dello stesso peso all' in- 

 circa. Di questi animali, quello iniettato col filtrato morì in 30 ore con tutti 

 i fenomeni del tetano sperimentale acutissimo, come se fosse stato iniettato 



(!) Tizzoni e Caitani, 1. cit. 



