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Dopo  questo  dosaggio  preliminare,  si  eseguivano  gli  esperimenti  di  sen- 
sibilizzazione, ponendo  in  piccoli  Erlenmeyer  sterili:  1°)  quantità  di  soluzione 
fisiologica  tali  da  rendere  pari  in  tutte  le  prove  il  volume  finale  del  liquido; 
2°)  quantità  uguali  di  antigene;  3°)  quantità  diverse  di  siero  batteriolitico. 
Gli  Erlenmeyer,  ben  tappati,  erano  tenuti  in  termostato  per  un'ora;  e  quindi 
i  liquidi  venivano  centrifugati  per  mezzo  d'una  centrifuga  elettrica  a  forte 
velocità  di  rotazione  (circa  6000  giri  al  minuto).  Il  liquido  limpido  che  si 
separava  dai  corpi  batterici,  era  decantato  con  pipette  sterili  e  se  ne  dosava 
il  potere  batteriolitico,  così  come  s'era  dosato  quello  del  relativo  siero  :  ve- 
dendo cioè  qual  era  la  quantità  minima  di  esso  che,  messa  in  contatto  con 
era.3  0,1  di  nuova  sospensione  batterica,  era  capace  di  far  deviare  completa- 
mente, nelle  condizioni  già  dette,  la  quantità  di  complemento  contenuta  in 
era.3  0,05  di  siero  fresco  di  cavia. 
Contemporaneamente  alla  titolazione  dei  liquidi  centrifugati,  veniva 
ripetuta  quella  del  siero  batteriolitico.  Così,  impiegando,  nelle  diverse  serie 
di  prove  da  confrontare,  lo  stesso  siero  di  cavia  ed  alla  stessa  distanza  di 
tempo  dal  suo  prelevamento  dall'animale,  erano  evitati  i  possibili  errori 
dipendenti  da  differenze  dell'attività  del  complemento. 
In  queste  prove  di  dosaggio,  tenute  in  termostato  per  due  ore,  si  vedeva 
quali  erano  le  quantità  dei  diversi  liquidi  centrifugati  e  le  quantità  di  siero 
che  si  mostravano  equivalenti  per  il  grado  d'emolisi  che  avevano  permesso; 
badando  principalmente  alle  quantità  minime  che  avevano  dato  completa 
deviazione  del  complemento,  e  alle  quantità  massime  che  non  avevano  ancora 
impedito  l'emolisi  completa.  I  tubi  venivano  poi  tenuti  in  ghiacciaia  per 
ventiquatti'ore  e,  man  mano  che  l'emolisi  progrediva,  si  pigliava  nota  delle 
nuove  equivalenze  che  si  rendevano  palesi.  Dai  diversi  rapporti  tra  le  quan- 
tità equivalenti  di  ciascun  liquido  centrifugato  e  del  siero,  si  ricavava  un 
valore  medio,  che  indicava,  con  migliore  approssimazione,  l'abbassamento 
del  potere  batteriolitico  del  siero  in  seguito  al  contatto  coi  corpi  batterici, 
nella  relativa  prova  di  sensibilizzazione.  Da  esso,  conoscendo  le  diluizioni 
e  le  quantità  adoperate,  era  facile  di  calcolare,  in  volumi  equivalenti  di  siero 
batteriolitico,  la  quantità  di  sensibilizzatrice  che  s'era  legata  ai  batteri. 
Durante  tutti  gli  esperimenti  si  ebbe  la  massima  cura  d'evitare  ogni 
causa  di  possibile  inquinamento  dei  liquidi. 
Esperimenti  eser/uiti. 
1  Serie. 
Come  ho  già  detto,  eseguii  il  primo  gruppo  di  esperimenti  con  un  siero 
antitifico.  Il  suo  potere  batteriolitico  era  basso:  infatti,  usando,  nelle  prove 
di  dosaggio,  cm.s  0,1  della  solita  sospensione  batterica  su  4  cm.3  di  liquido, 
cm.3  0,05  di  siero  fresco  di  cavia  e  poi  cm.3  1  di  sospensione  ((all'uno  su  20 
di  corpuscoli  rossi  sensibilizzati  con  due  unità  emolitiche  di  siero,  la  quan- 
