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La presenza di notevoli quantità di calcare nell'acqua Marcia di Roma, 

 per l'aggiunta del fosfato di potassio, dà luogo alla formazione di un abbon- 

 dante precipitato di fosfato di calcio, cbe non solo forma una sottile pelli- 

 cola alla superficie del liquido, ma anche un notevole deposito al fondo. Pe- 

 raltro non ho motivo di ritenere che tale circostanza — la quale è la sola 

 che, mi sembra, debba segnalarsi — muti di troppo le condizioni dell'espe- 

 rienza ottenute dal Beyerinck. 



Entro il termine di 3-4 giorni, notai un evidente sviluppo microbico il 

 quale dette luogo, oltre che ad intorbidamento del liquido, anche alla for- 

 mazione di un'abbondante pellicola gelatinosa, che in breve tempo invase 

 tutta la superficie del liquido stesso e calò in brani più o meno grandi al 

 fondo. Una parte di detta pellicola si presentò dopo poco tempo colorata di 

 un colore giallo-bruno. 



Proceduto ad un esame microscopico del liquido di cultura, potei segna- 

 lare, oltre a pochi individui di bacteri comuni del terreno, alcune specie di 

 corti e piccoli bacilli, molto mobili, notevoli per la loro presenza in numero 

 ragguardevole ed un grosso cocco, muoventesi lentamente, che per le carat- 

 teristiche morfologiche deve ascriversi al genere Azolobacter di Beyerinck e 

 molto probabilmente alla specie chroococcum. 



Infatti, esso misura intorno ai 3-4 /n di diametro, presenta il contenuto 

 protoplasmatico granuloso e la riproduzione scissipara per cui si ottiene in 

 forme di diplococco caratteristiche. 



Presi a tentarne l' isolamento ed il metodo seguito a questo scopo è 

 stato parimenti quello del Beyerinck, basato sull'uso di un substrato solido 

 della seguente composizione : 



Dieci gr. di un tale miscuglio, inoculato con alcuni decimi di diluizioni 

 molto avanzate della cultura bruta, li versai in scatola di Petri. Le culture 

 ripetute parecchie volte sono state eseguite a 28° C. 



Dopo circa tre giorni si cominciarono a sviluppare sulle piastre alcune 

 colonie appartenenti a non più di tre o quattro differenti specie ed alcune, 

 mentre l'altre s'arrestavano nello sviluppo, seguitarono ad accrescersi così da 

 raggiungere e sorpassare anche un centimetro di diametro. Esse si presentarono 

 a margine subrotondo, intero, di colore bianco-opaco, di aspetto gelatinoso. 

 Esaminate al microscopio potei constatare ch'erano costituite dalla stessa 

 forma di Azotobacterio che avevo già segnalato nelle culture brute. Procedei 

 adunque all'isolamento eseguendo colture con agar a becco di flauto della 



Rendiconti. 1905, Voi. XIV, 2° Sem. 79 



Acqua distillata . . . . 



Mannite 



Fosfato bibasico di potassio 

 Agar 



100 



2 



0,02 

 2 



