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l'apparecchio meno il tappo di sughero è sterilizzato a 150° C. per mezz'ora. 

 La sterilizzazione definitiva, tenendo l'apparecchio come mostra la fig. 1, è ese- 

 guita in una stufa ad aria secca a 100° C. per un quarto d'ora per tre giorni 

 consecutivi. 



La stufa a vapore circolante non può esser adoperata per l'inconveniente 

 già lamentato della condensazione del vapor acqueo sulla superficie interna 

 delle pareti del pallone. Il raffredamento dell'apparecchio dopo l'ultima ste- 

 rilizzazione è compiuto mentre l'apparecchio stesso trovasi in una posizione 

 tale da determinare il consolidamento dell' agar secondo una superficie incli- 

 nata. Le ninfe dopo la sterilizzazione esterna vengono rapidamente fatte ca- 

 dere dal tubo dell' ultimo passaggio in quello contenente l'agar dell'appa- 

 recchio di coltura. Quest'ultima operazione è così rapida, che il contatto del- 

 l'aria esterna non è più lungo di quello che si verifica in un trapianto or- 

 dinario di coltura. 



Il tubo da saggio dell'apparecchio è ora allontanato, tirandolo dall'estre- 

 mità esterna, dal cotone che chiude l'apertura per cui sono passate le ninfe 

 (fig. 2). L'agar nutritiva adoperata è un substrato favorevole allo sviluppo 

 delle mosche e a quello dei batteri più comuni dell' aria, in special modo 

 poi vi si sviluppano abbondantemente i bacilli della larva. Apparecchi più 

 semplici e più sensibili per ciò che riguarda il controllo della sterilità del 

 recipiente di coltura sono stati adoperati facendo uso di matracci Erlenmeyer 

 con uno strato di agar al fondo, oppure dei grossi tubi da saggio contenenti 

 alcuni centimetri cubici della medesima agar. Gl'insuccessi più comunemente 

 sono dovuti allo sviluppo di Penicillium glaucum. Dopo un mese circa da 

 che le mosche erano nate, venivano gettate rapidamente nei recipienti di col- 

 tura da un tubo sterilizzato, due o tre olive sterilizzate pur esse all'esterno 

 con sublimato. 



La deposizione delle uova nelle condizioni descritte avviene dal 35° al 

 45° giorno dalla nascita. (Temperatura media 25° C). 



Gli esperimenti furono ripetuti per due generazioni di mosche serven- 

 dosi di 20 ninfe di 5-8 giorni per ciascun apparecchio di coltura. I risultati 

 ottenuti in quelle colture, nelle quali la sterilizzazione dell'apparecchio e 

 quella esterna delle ninfe si è dimostrata perfettamente effettuata e gl'in- 

 quinamenti dall' esterno non si sono verificati, si possono riassumere come 

 segue : 



1° Le larve nate da uova depositate in olive sterili da mosche nate 

 e vissute in ambiente sterile, presentano i soliti batteri nelle tasche gastriche 

 anche prima di uscire dall'involucro dell'uovo. 



2° La maggior parte delle colture in ambiente sterile condotte nel 

 modo descritto, presentano dopo 10 giorni circa dalla nascita dell'adulto un 

 abbondante sviluppo dei batteri della larva sopra la superficie dell' agar. 



3° Con 1' originarsi delle colonie batteriche, coincide la morte della 

 maggior parte delle femmine e più raramente dei maschi. 



