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Per eseguire il trasporto nel miglior modo possibile, s'impiegarono tubicini di 

 vetro bene puliti e previamente sterilizzati a secco. Essi riempironsi sul 

 luogo stesso con la terra prelevata chiudendoli subito con tappo di sughero 

 a tenuta, così che non avesse potuto scemare o perdersi durante il viaggio 

 il naturale contenuto in acqua del campione: indi si avvolsero con carta nera 

 e si spedirono per mezzo postale. 



Con ciascuno dei quindici campioni suddetti, man mano che pervenivano 

 al laboratorio, eseguii il procedimento qui appresso descritto, che va dalle 

 culture di presa ai passaggi selezionati proposti dall' Omelianski ed all'isola- 

 mento delle forme con la modificazione del metodo da me stesso proposta. 



In Erlenmever di 250 cm. 3 di contenuto, introdussi una certa quantità 

 di scorie e gr. 0,5 di carbonato di magnesio in polvere, e, dopo sterilizza- 

 zione nella stufa ad aria, aggiunsi 50 cm. 3 del liquido selezionante, sterile, 



d'Omelianski : 



solfato ammonico 2,0 



cloruro sodico 2,0 



fosfato potassico 1,0 



solfato di magnesio 0,5 



solfato ferroso 0,4 



acqua distillata 1000,0 



L'inoculazione di ciascun recipiente veniva fatta con grammi 0,5 del ter- 

 reno da sottoporsi ad esame e le culture erano mantenute in termostato 



a 28° C. 



Quando nei liquidi di cultura, trattati con il reattivo iodo-amidico del 

 Tromsdorff, appariva molto forte la reazione dell'acido nitroso, ciò che in 

 media s'otteneva dopo trascorsi circa 10-12 giorni dall'innesto, si procedeva 

 ai passaggi selezionanti consigliati dall'Omelianski. 



In provette, piuttosto larghe, preparate con scorie, carbonato di magnesio 

 e soluzione di Omelianski nel modo di sopra detto e nelle già determinate 

 proporzioni, si eseguiva l'innesto con una sola ansa di materiale infettante, 

 dopo di che i tubicini si ponevano in termostato a 28° C. adagiati quasi oriz- 

 zontalmente. Kegolandomi anche qui con la reazione di Tromsdorff, coglieva il 

 momento più opportuno per eseguire nella stessa maniera il successivo pas- 

 saggio. I passaggi selezionanti che si susseguirono a distanze sempre più abbre- 

 viate di tempo, per la diminuzione del cosidetto periodo ^incubazione, dovuta 

 all'aumentante virulenza del microrganismo, furono, per ciascun campione di 

 terreno, tre. 



La modificazione che introdussi nel metodo d'isolamento dei microrga- 

 nismi della nitrificazione ( 1 ), eliminando la poco agevole preparazione del 



(') Y. questi Reiid., voi. XIV, 1° sem. 1905, fase. 4°, pag. 228. 



