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M. W. BEIJERINCK ET A. VAN DELDEN. 



quelques rares germes de Granulobacter qui, en dépit de toutes nos 

 précautions, avaient été présents dans la matière d'infection considérée 

 à tort comme pure, et avaient ainsi passé dans le liquide nourricier 

 ou y étaient tombés lors de l'infection. Mais, ainsi que nous Pavons dit 

 tantôt, après de nombreuses expériences, il n'était plus possible de dou- 

 ter de l'exactitude de nos observations. 



Toutes ]es espèces du genre Granulobacter perdent facilement leur 

 pouvoir fixateur d'azote libre par une culture prolongée à l'air, comme 

 c'est le cas p. ex. pour les cultures pures sur un terrain solide. 

 La preuve de ce fait nous a paru importante et nous a engagés à insérer 

 dans les tableaux mainte détermination qui autrement n'aurait pas dû 

 être prise en considération, eu égard à la faible quantité d'azote fixée. 

 Mais, comme ces déterminations se rapportaient toujours à des cultures 

 qui, au commencement, c. à cl. après leur isolation récente, avaient 

 donné un gain d'azote très considérable, il n'était pas sans intérêt de 

 les noter. 



La perte de cette fonction va exactement de pair avec le pouvoir que 

 possèdent les mêmes formes de se contenter de peu d'oxygène pour leur 

 croissance, c. à cl. avec la perte de leur microaérophilie, ce qui résulte 

 aussi de leur culture en plein air. *) 



Pour des expériences sur la fixation d'azote, où l'on se sert de Gra- 

 nulobacter, ces remarques sont importantes: si l'on désire fixer beau- 

 coup d'azote, il est recommandable de se servir de cultures pures 

 fraîchement isolées. A cet effet on doit introduire dans la solution 

 nourricière du terreau pasteurisé et le Chroococcum; au bout de 2 à 3 

 jours on obtient une culture profuse de Granulobacter -j- C7iroococcum. 

 On inocule ensuite sur de Pagar au glucose, et les colonies aérobies de 

 Granulobacter ainsi obtenues, qui généralement s'étendent de tous cotés 

 jusqu'à de grandes distances, sont immédiatement mises à profit pour 

 les cultures combinées. Si l'on veut transporter le microbe sur un 

 terrain solide dans des éprouvettes pour des cultures en séries, on fait 

 bien d'y ajouter le Chroococcum, parce qu'on évite ainsi jusqu'à un cer- 

 tain point la dégénérescence du Granulobacter , le Chroococcwn diminuant 

 la tension de l'oxygène en solution clans le milieu de culture. 



La haute pression de l'oxygène atmosphérique a pourtant une influence 



x ) On ne peut pas se servir ici du mot „anaérobiose", puisqu'il s'agit 

 d'espèces qui se laissent fort bien cultiver à l'air libre. 



