﻿ASSIMILATION DE I? AZOTE LIBRE PAR LES BACTERIES. 331 



mulations obtenues par infection avec de la terre fraîche, mais dans les 

 transports successifs cela devient de plus en plus difficile; au bout de 

 plusieurs inoculations le Radio!) acier , et les autres compagnons non 

 sporogènes de Chroococcum, refoulent le Granulobacter d'une façon si 

 complète, qu'il n'est plus possible de le découvrir sous le microscope et 

 que même les méthodes par culture restent sans résultat. 



Leur isolation réussit par contre aisément quand on part de la méthode, 

 citée en seconde ligne, c. à d. de la culture „par accumulation par- 

 tielle", qui résulte de l'infection d'une solution nourricière à mannite au 

 moyen de terre pasteurisée et de Chroococcum. La pasteurisation s'obtient 

 en suspendant la terre pendant 5 minutes dans dé Teau chauffée à 85° G. 

 Dès que les cultures à 28° C. commencent à montrer une pellicule de 

 Chroococcum bien développée, ce qui prouve que la fixation d"azote 

 est en train, on s'en sert pour tracer des traits inoculatoires sur des 

 plaques d'agar au glucose et phosphate ] ), donc sur le même terrain 

 que celui sur lequel nous avons isolé le Chroococcum, lui-même; ces 

 plaques sont ensuite exposées également à une température de 28° C. 

 Nous avons isolé de cette manière 5 formes appartenant au genre 

 Granulobacter 2 ), dont chacune fixe de l'azote par symbiose avec Chroo- 

 coccum. Elles sont assez proches parents les unes des autres et peuvent 

 probablement être réduites à une ou deux espèces. 



Nous avons notamment constaté que les formes isolées des accumu- 

 lations perdent plus ou moins complètement leur caractère primitif 

 par transport répété dans les cultures pures; il en résulte une conver- 

 gence des diverses formes vers une forme limite, qui n'est toutefois 

 atteinte par aucune d'elles. 



On doit chercher la raison de cette transformation dans le fait que ces 

 organismes ne supportent pas, à la longue, la pression de l'oxygène atmos- 

 phérique; tout ce qui diminue cette pression retarde aussi la vitesse de 

 transformation. On y arrive p. ex. en introduisant, dès le commence- 



1 ) De pareilles plaques, obtenues au moyen de 2 gr. d'agar, 2 gr. de glucose 

 et 0,05 gr. de K 2 HP0* dans 100 cm 3 , d'eau de conduite, sont très humides après 

 solidification dans la boîte de verre; on doit donc les chauffer avec précaution 

 et lentement à Vétat solide jusqu'à ce que leur surface soit entièrement „sèche". 

 Les quelques gouttes d'eau qui s'évaporent se condensent sur le couvercle, que 

 l'on essuie après. 



2 ) Pour la description de ce genre je renvoie à mon travail: Sur la fermen- 

 tation et les ferments butyliques. (Ces Arçhives, (1), 29, 10, 1896). 



ARCHIVES NÉERLANDAISES, SERIE II, TOME VIII. 22 



