II. Untersuchungsmetoden. 



Die Untersuchungen gründen sich vornehmlich auf zwei Metoden : 



1) Vitalfärbungen mit Neutralrot, Methylenblau, Brillantkresylblau, Alizarin 

 u. a. Farbstoffen. 



2) Vergleich der auf diese Weise gewonnenen Resultate mit Beobachtungen 

 über die Exkretionsprodukte bei den untersuchten Formen 



Untersuchungen an Schnitten wurden nur zur Kontrolle gewisser Beobachtungen 

 an lebenden Tieren ausgeführt. Einige Male war es notwendig, das vitale Färbungs- 

 bild am Schnitt zu kontrollieren. Leider ist es gegenwärtig nur das Methylenblau, 

 welches sich fixieren lässt 1 . Die gewöhnliche BETHE-Metode [(Ammoniumpikrat-) Am- 

 moniummolybdat-Osrniumsäure mit verschiedenen Modifikationen] ergibt wohl oft 

 eine ausgezeichnete Methylenblaufixierung, lässt aber hinsichtlich der histologischen 

 Details viel zu wünschen übrig. Ich habe gefunden, dass eine kurze Vorfixierung 

 mit irgendeiner Sublimatlösung (am besten Gilson's Mischung 2 ) der letzteren Un- 

 gelegenheit abhilft. 



Die Metode gestaltet sich nach dieser Modifikation f olgendermassen : 



1) Fixierung 1 bis 10 Min. (je nach der Grösse) in Gilson's Mischung (kalt) ; die 

 Tiere werden darnach flüchtig mit Löschpapier getrocknet (grössere Formen) oder direkt in 



2) 5 — 8 %iges Ammoniummolybdat (wechseln!) für einige Stunden überfuhrt (am 

 besten in der Kälte). 



3) flüchtiges Abspülen mit Wasser ; 



4) 96 ,%iger Alkohol 5—15 Minuten; 



5) absol. Alk. 1 /2 — 1 Stunde (wechseln!); 



6) Xylol, Paraffin u. s. w.; 



Der Farbstoff wird ebensogut fixiert wie mit der reinen BETHE-Metode; eine 

 Lösung des Farbstoffes bei der Vorfixierung habe ich nicht beobachtet; ausserdem 

 erspart man die teure Osmiumsäure. Auch in histologischer Hinsicht stehen die 



1 Es ist mir nicht gelungen die Neutral rot färbe mit Sublimat zu fixieren, wie es Vonvillee 

 u. Skrauis für Protozoen anwandten (s. Böhm u. Oppel: Taschenbuch d. mikroskop. Technik). 

 Kürzlich fand ich aber eine Metode von Golovine (Golovine, E., Sur le fixage du Neutralroth. 

 Zeitschr. f. wiss. Mikr. Bd 19, 1902), die vielleicht bessere Eesultate ergeben kann. 



2 Diese Eixierungsflüssigkeit (siehe Böhm u. Oppel) ergibt nach meiner Erfahrung aus- 

 serordentlich gute und sichere Eixierungsresultate. Die Tiere strecken sich aus und behalten auch 

 sonst ihr natürliches Aussehen wohl bei, weit besser als hei Anwendung von reiner Sublimatlösung 

 oder von Sublimat-Eisessig. 



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