vezes, levando-se o mesmo preparado ao campo do ultra-microscópio, onde 

 se examina com igual combinação e com o disco 10 do eondensor de REI- 

 CHERT. Possuindo bainha o exemplar, podem-se eliminar as seguintes 

 microfilárias : juncea, volvidas e tucumana (***), faltando somente esta- 

 belecer-se o discrime das 2 restantes: microfilária nocturna e m. diurna. 

 Nesta altura das pesquisas é que se ha de recorrer ao 



a) 2.° Exame de sangue fresco, com coloração vital, ou colo- 

 ração a fresco, conforme RODENWALDT mais precisamente a denomina. 



Dentre os corantes aconselhados para êsse fim por FÜLLEBORN e 

 RODENWALDT (62-a) : o azul de cresil brilhante, o vermelho neutro, o 

 azul de metilénio e a azur II, só não experimentei o primeiro; e, dos três 

 últimos, o azur II e o azul de metilénio é que, em minhas mãos, deram 

 melhor resultado. O azur II, diluido a 1:1000 na água destilada, deu -me 

 sempre colorações pouco nítidas, pelo que o concentrei com vantagem 

 para 2:1000, verificando todavia que as microfilárias, impregnadas pelo 

 corante neste título, resistiam menos do que quando êle estava na l. a di- 

 luição, e morriam ao cabo de 8 a 10 horas, ou sejam, em média, 6 horas 

 mais cedo do que com o método original. Costumo adicionar ao soluto de 

 azur II era água — de acordo com FÜLLEBORN (63-a) que o emprega 

 meio alcalinizado — algumas gotas de carbonato de patássio a 1 o/oo, 

 mais ou menos segundo a técnica usada com o corante de GIEMSA. 



O azul de metilénio a 1 :2000 em água destilada resultou também satis- 

 fatoriamente. 



Quanto ao vermelho neutro, jamais em minhas mãos produziu bons 

 efeitos, nem mesmo quando eu lhe intensificava o poder corante com o 

 ácido clorídrico diluido, porquanto neste caso as microfilárias morriam 

 dentro em pouoo, ficando eu impossibilitado de apreciar a impregnação 

 progressiva de suas células pelo corante. 



Com o azur II a 2 o/oo assim se procede: 



Tira-se, à meia noite, uma gota de sangue, depõe-se em uma lâmina que 

 se cobre logo com uma lamínula portadora de uma gota da solução corante, 

 tendo-se a precaução de fazer-se a preparação em camada delgada, afitm 

 de as microfilárias ficarem livres no campo, sem o estorvo das pilhas glo- 

 bulares, e de poder-se acompanhar a impregnação gradual das suas célu- 

 las; examina-se, sem grande demora, sob imersão e de preferência 



1 



com a combinação Oc. III x ob. — im. 



12 



Vê-se a princípio que os embriões tomam atitudes interessantíssimas; 

 ficam mais ágeis, como que excitados, e depois se vão a pouco e pouco 

 imobilizando, até morrerem. 



Cumpre-me também assinalar o seguinte : a impregnação pelo reagente 

 se faz de extremidade cefálica para a caudal do embrião; primeira- 

 mente se colorem as células sub-cuticulares e depois as somáticas, cujo 

 núcleo aparece em azul intenso e o protoplasma com o aspecto opalino ; con- 

 servam-se claras, em destaque no meio, as diversas manchas, mormente a 



(***) A respeito desta microfilária, ARÂOZ e BIGLIERI, s'&us descobridores, pensa- 

 ram que ela possuísse bainha; mas, depois ROSENBUSCH verificou o contrário. 



